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脂肪酶作为一类重要的生物催化剂,其主要结构特征是由α螺旋的“盖子”结构覆盖其催化活性中心,因此“盖子”的翻转直接影响了脂肪酶的催化性能。胆汁盐是一类生物表面活性剂,其刚性的甾醇族骨架具有手性和平面两亲性,能够作用于“盖子”激活脂肪酶。因此,结合胆汁盐与脂肪酶的相互作用有望提高脂肪酶在1-苯乙醇酯交换反应中的手性拆分性能。本文首先选取六种胆汁盐,探究了各种胆汁盐浓度对两种不同来源脂肪酶(哺乳类PPL和真菌类CRL)催化性能的影响;然后将胆汁盐共价结合在聚丙烯腈纤维上,制备手性选择功能载体材料用于两种脂肪酶固定,并分析其手性拆分效果;最后以石胆酸和脱氧胆酸为原料对其羟基改性,合成手性不对称脲胆汁酸分子钳,再与脂肪酶混合探索手性胆汁酸分子钳对脂肪酶催化性能的影响。对多种类型胆汁盐作用脂肪酶催化性能的研究有了较为系统和深入的了解,研究结论如下:1.各种胆汁盐浓度变化对两种脂肪酶催化活性和对映体选择性趋势一致:随着胆汁盐浓度的增加呈现先增后减,并在各自CMC值附近达最大值。表明脂肪酶受一定浓度范围内的胆汁盐影响后其活性和对映体选择性同时得到了增强。两种来源的脂肪酶催化性能受胆汁盐影响程度不同:对于催化活性,CRL高于PPL;对于选择性,PPL却高于CRL。这主要取决于脂肪酶活性中心结构差异以及对胆汁盐的敏感度。2.制备的六种手性选择功能载体根据改性上的胆汁酸疏水性大小PAN-LCA>PAN-DCA>PAN-CDCA>PAN-CA>PAN-TDCA>PAN-TCA,决定了其改性载体具有一致的疏水性。结合脂肪酶趋于在疏水性载体吸附特性以及结合型胆汁酸长链端较长,弯曲性好易于捕捉溶液中游离酶特点,脂肪酶在各手性功能载体上吸附量,对于PPL,PAN-TCA(4.40 mg/g)>PAN-TDCA(3.42 mg/g)>PAN-NH2(2.65 mg/g)>PAN-LCA(2.52 mg/g)>PAN-CDCA(2.03 mg/g)>PAN-DCA(1.80 mg/g)>PAN-CA(1.53 mg/g);对于CRL,PAN-TCA(1.81 mg/g)>PAN-TDCA(1.54 mg/g)>PAN-NH2(1.30 mg/g)>PAN-LCA(1.05 mg/g)>PAN-CDCA(1.01 mg/g)>PAN-CA(0.92 mg/g)>PAN-DCA(0.86 mg/g)。在有机溶剂体系中聚集成块的游离酶活性较低,固定化的CRL或PPL均比游离态高出3-10倍左右;由于载体上胆汁酸协助识别作用,PPL的E值最高在PAN-CA、PAN-TCA上提高了9倍,最低在PAN-LCA上也提高了7.5倍左右;CRL最高在PAN-TCA上提高了3倍左右,最低在PAN-LCA提高了2倍左右。3.两种手性不对称脲胆汁酸分子钳的制备,用核磁质子峰分裂及偏移方法证明了分子钳对纯对映体1-苯乙醇存在结合作用。两种分子钳添加到脂肪酶酯交换拆分外消旋1-苯乙醇体系中,其活性分别是PPL添加手性不对称脲脱氧胆酸分子钳提高5%,添加手性不对称脲石胆酸分子钳提高27%;CRL也相应提高了43%和22%;而脂肪酶的对映体选择性略有提高但不明显。