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甲壳动物不具有免疫球蛋白,对机体的保护作用主要是由血细胞来承担的。血细胞随着血液循环分布到身体各处,发挥着吞噬、结节、包囊等免疫防御功能。深入研究血细胞的起源分化,以及血细胞在病毒(WSSV)入侵过程中的反应和变化,对于进一步阐明甲壳动物的免疫机制、循环血细胞和造血细胞相互关系、病毒入侵的分子机制以及提出有效防治WSSV方法等问题上有着积极意义。 甲壳动物血细胞不能进行有丝分裂,它们的更新补充是由造血组织来完成的。在本论文中,使用了抗中国对虾血细胞的单克隆抗体,在分子水平上,通过冰冻切片和间接免疫荧光染色法,对中国对虾仔虾的造血组织进行定位,辅助以石蜡切片H.E.染色结果确定:额剑基部、头胸部的附肢基部、第二触角鳞片、第三颚足、胃上部、胃前部等部位存在着造血组织。造血组织呈两种形态,一种是团块样的实质组织,另一种则紧紧包裹在血管壁外侧上。实验中还比较分析了循环血细胞和造血细胞的差异。 作为机体保护功能的主要承担者,血细胞在病毒感染过程中会发生变化,起到一定的作用。在本论文中,借助鼠抗WSSV的单抗和兔抗对虾血细胞的多抗,再连接碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗鼠IgG和辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG,在与DAB和NBT/BCIP底物反应后,被病毒感染的血细胞就被标记上两种呈不同颜色的阳性信号,同时所有的血细胞和被病毒感染的细胞也都能被标记出来。应用这种双重免疫组化方法观察了被WSSV感染的血细胞在几种组织中的分布情况,发现在轻度感染组织中被侵染的血细胞在所有被感染细胞中占绝大多数,而在高度感染组中血细胞数目明显减少,细胞变形,出现许多的细胞碎片,同时被病毒感染的细胞数目增多,染色强度增强,组织坏死严重。从而说明在WSSV侵染扩散过程中,血细胞首先识别病毒并进行抵御,但正是在血细胞的协助下,病毒扩散到了全身各组织。