16S rRNA基因定量PCR检测牙周可疑致病菌与慢性牙周炎相关性的研究

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目的:采用16S rRNA DNA TaqMan实时荧光定量PCR技术对慢性牙周炎基础治疗前后龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(Pg)、福赛坦氏菌(Tf)、齿垢密螺旋体(Td)进行检测,以了解三种细菌在慢性牙周炎基础治疗前后的变化及细菌检出率、量与牙周临床指标的关系。方法:选取12例慢性牙周炎患者50个位点,标准纸尖采集龈下菌斑标本,记录临床指标;牙周基础治疗后4周,再次采集龈下菌斑标本,记录临床指标。分别构建三种目的基因的标准质粒,建立定量标准;应用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测样本中的Pg、Tf和Td。结果:Pg、Tf在慢性牙周炎中的检出率分别为84%、98%,治疗后检出率下降,分别为48%、48%;Td的检出率为86%,治疗后为96%;但三种细菌治疗前后的检出率差异均无统计学意义。细菌的检出量经对数转换后,慢性牙周炎治疗前后Pg和Tf的差异有统计学意义,Td的差异无统计学意义。治疗前后临床指标探诊深度(PD)、菌斑指数(PLI)、出血指数(SBI)、临床附着丧失(CAL)改善明显(P﹤0.05);慢性牙周炎中细菌与PD、SBI临床指标相关,三种细菌之间均两两相关。结论:TaqMan实时荧光定量PCR技术检测细菌灵敏度高,检出率高; Pg、Tf和Td与PD、SBI相关;慢性牙周炎经牙周基础治疗后,临床指标改善明显,改变牙周袋内龈下菌斑Pg、Tf和Td的量。
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