【摘 要】
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目的 以腺病毒为载体构建突变型p27 kip1(p27mt),并将其注射到人大肠癌SW480裸鼠模型肿瘤瘤体内,通过观察肿瘤生长情况及肿瘤生长抑制率,研究外源性突变型p27 kip1(p27mt)基因对
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目的 以腺病毒为载体构建突变型p27 kip1(p27mt),并将其注射到人大肠癌SW480裸鼠模型肿瘤瘤体内,通过观察肿瘤生长情况及肿瘤生长抑制率,研究外源性突变型p27 kip1(p27mt)基因对大肠癌的体内抑制作用。 方法 应用细胞移植法把人大肠癌SW480细胞接种于BalB/c裸鼠皮下,成功构建大肠癌裸鼠模型27只,随机分为p27mt组、Lac-Z组和空白对照组,每组9只。将已成功构建的腺病毒介导的突变型p27 kip1(Ad-p27mt)0.1ml(病毒含量1010pfu)、Lac-Z0.1ml(病毒含量1010pfu)和PBS0.1ml采用瘤体内直接注射法注射到瘤体内,3日一次,共3次,注射后每3日一次测量肿瘤最长径及最短径,计算每组肿瘤平均体积,绘制肿瘤生长曲线。4周后断颈椎处死裸鼠,剥离肿瘤,称质量,计算肿瘤生长抑制率。利用剥离肿瘤组织制备单细胞悬液,进行细胞调亡的相关检测。 结果 应用细胞接种法接种后,肿瘤生长潜伏期7~10日,14日肿瘤平均体积0.5cm(0.48±0.23)左右,成瘤率100%,肿瘤生长较为均一,动物生长状况良好,连续治疗观察4周,动物无死亡。肿瘤生长曲线:组间比较P27mt与对照组、Lac-Z组差异有显著性(P<0.01),空白对照组与Lac-Z组无统计学差异(P>0.05),断颈椎处死动物无菌剥离肿瘤后,称瘤质量,肿瘤抑制率38.2%,差异有显著性(P<0.01),P27mt与对照组、Lac-Z组差异有显著性(P<0.01),空白对照组与Lac-Z组无统计学意义(P>0.05)。细胞调亡检测:P27mt组凋亡细胞42.8%,Lac-Z组6.38%,空白对照组7.25%,P27mt组与对照组、Lac-Z组差异有显著性(P<0.01),空白对照组与Lac-z组无统计学意义(P>0.05)。 结论 Ad-p27mt基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制,有更强的促调亡作用,与Lac-Z、对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。Ad-p27mt基因对大肠癌裸鼠模型的体内肿瘤生长有明显的抑制作用。
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