前言急性脑梗死(acute cerebral infarction)是我国常见病和多发病,且发病率逐年增加,其发病率和致残率居首位。颈动脉粥样硬化(carotid atherosclerosis)是急性脑梗死的常见原因。研究发现,颈动脉粥样硬化的发生与动脉内皮功能异常密切相关。炎症机制参与了血管内皮损伤,并导致动脉粥样硬化的形成和进展。晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end products, AGEs)能与细胞表面受体结合,激活一系列信号传导系统,从而加重血管内皮损伤,诱导动脉粥样硬化的形成。晚期糖基化终末产物受体(receptor advanced glycation end-products, RAGE)能与AGEs、钙粒蛋白和淀粉样蛋白等配体特异性结合,激活下游的核转录因子NF-κB (transcription factor nuclear factor-κB, NF-κB),继而增强细胞黏附分子-1(intercellular adhension molecule-1, ICAM-l)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activitor inhibitor-1, PAI-1)及单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)、血管细胞粘附分子(vascular cell adhesion molecule 1, VCAM-1)等炎症介质表达,启动并加剧动脉粥样硬化病理过程,同时诱导基质金属蛋白酶表达,加剧动脉粥样硬化斑块的不稳定性。RAGE基因定位于染色体6p21.3,共含有11个外显子和10个内含子,长约3.27kb。已有超过30多种RAGE基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)位点被发现,其中位于启动子区及外显子区域的SNP能够影响RAGE基因的表达和功能,其中最受到关注的主要有-429T/C(rs1800625)、-374T/A(rs1800624)和G82S(rs2070600)等3种;此外,RAGE基因的表达还受到RAGE剪切变异体的调控。血清可溶性RAGE (solubleRAGE, sRAGE)能竞争性结合RAGE,继而缓解下游的炎症反应,从而延缓动脉粥样硬化过程。此外,新近发现的钙粒蛋白超家族成员S100A12(extracellular newly identified RAGE binding protein, EN-RAGE)作为一种促炎症因子,与RAGE特异性结合,增强下游的炎症信号通路,加重动脉粥样硬化的过程,并与动脉粥样硬化斑块的稳定性密切相关。目的本研究通过对急性脑梗死和正常对照组进行RAGE-374T/A基因多态性、血清sRAGE和EN-RAGE水平进行检测,并测量两组患者颈动脉内膜-中膜厚度(IMT),对以下问题进行探讨：1、通过分析急性脑梗死和正常对照两组间的RAGE-374T/A基因多态性,探讨RAGE-374T/A基因多态性对急性脑梗死发病的影响；2、通过分析急性脑梗死不同亚型、有无合并糖尿病及颈动脉粥样硬化等亚组间的RAGE-374T/A基因多态性及等位基因频率,探讨RAGE-374T/A基因亚型对急性脑梗死的影响；3、通过分析急性脑梗死有无颈动脉粥样硬化、有无合并糖尿病及不同基因亚型间血清sRAGE、EN-RAGE水平,探讨sRAGE、EN-RAGE与颈动脉粥样硬化及RAGE-374T/A基因多态性的相关性。4、采用Logistic回归分析探讨颈动脉粥样硬化的危险因素;方法1、回顾性分析自2011年至2015年在青岛市中心医院神经内科收治的急性脑梗死患者325例的临床资料,记录患者基线资料(包括年龄、性别、既往疾病史)等；同期选取接受健康查体的人群,其中年龄、性别与急性脑梗死组无差异；采用彩色多普勒超声检测两组人群颈动脉内膜-中膜测定(Intima-Media Thickness, IMT);2、采用酚-氯仿法抽提两组人群基因组DNA,采用PCR-限制性酶切片段法分析两组人群RAGE-374T/A基因多态性；3、采用双抗体夹心法检测两组血清sRAGE、EN-RAGE水平；结果1、急性脑梗死组患者在高脂血症、糖尿病、IMT、血清CRP、总胆固醇及LDL-c等方面显著高于对照组,差异具有统计学意义；而在合并高血压病、吸烟及HDL等方面无差异；急性脑梗死组患者sRAGE及EN-RAGE水平与对照组比较,差异具有显著统计学意义(t=31.16,p=0.000;t=28.04,p=0.003)。2、急性脑梗死组RAGE-374T/A基因多态性与对照组比较,差异具有统计学意义(x2=11.449,p=0.003),其中急性脑梗死组TT频率高于对照组(26.2%vs 14.3%),AA频率低于对照组(23.3% vs 27.6%);而RAGE-374A等位基因频率显著低于对照组(48.6%vs 56.7%;x2=4.116,p=0.042),提示RAGE-374A等位基因对急性脑梗死可能具有保护作用。3、急性脑梗死不同亚型间RAGE-374T/A位点基因多态性及等位基因频率差异无统计学意义,提示RAGE-374T/A位点基因多态性与卒中亚型无关。4、与未合并糖尿病患者比较,合并糖尿病患者RAGE-374T/A基因亚型及等位基因频率无显著差异(x2=3.402,p=0.183;x2=3.366,p=0.067)；5、按照有无合并颈动脉粥样硬化,我们将急性脑梗死患者分成2个亚组。2亚组RAGE-374TT、TA及AA基因亚型的分布频率有显著统计学差异(x2=4.13,p=0.005);合并颈动脉斑块组AA基因亚型频率及A等位基因频率均低于未合并颈动脉斑块组,但提示A等位基因可能对颈动脉粥样硬化斑块形成具有保护作用。6、我们将急性脑梗死按照有无合并颈动脉粥样硬化分为2个亚组,比较2亚组相关因子的血清sRAGE及EN-RAGE水平差异。结果表明,与未合并颈动脉粥样硬化组比较,合并颈动脉粥样硬化的急性脑梗死患者血清sRAGE显著下降(2.81±0.6 vs 3.02±0.74,t=2.59,p=0.047),而EN-RAGE水平显著升高(33.46±2.25 vs 24.51±1.37,t=44.56,p=0.000)。7、我们进一步按照有无合并糖尿病对急性脑梗死患者进行亚组间sRAGE及EN-RAGE水平比较。结果表明,与未合并糖尿病足患者比较,急性脑梗死合并糖尿病血清sRAGE及S100A12水平显著升高(3.01+0.95 vs 2.53±0.64,t5.41,p=002；32.58±2.47 vs 23.62±3.24,t=25.75,p=0.000)。8、为明确急性脑梗死RAGE-374T/A不同基因亚型对血清sRAGE水平的影响,按照有无合并颈动脉粥样硬化将急性脑梗死分为2个亚组进行比较(表12),结果表明,合并颈动脉粥样硬化的-374AA亚型急性脑梗死患者血清sRAGE水平显著显著低于TT及TA亚型(2.67±0.82 vs 2.98±0.47,t=2.57,p=0.016),而未合并颈动脉粥样硬化的-374AA亚型急性脑梗死患者血清sRAGE水平显著高于TT及TA亚型(3.05.+0.76 vs 2.58.+0.62,t=4.18,p=0.000)。9、我们采用logistic回归分析了急性脑梗死基线资料的相关因素及RAGE-374T/A基因位点A等位基因与颈动脉粥样硬化的相关性(表13)。结果表明,年龄、糖尿病、CRP水平、血清sRAGE及EN-RAGE水平、RAGE-374A等位基因是颈动脉粥样硬化的独立的危险因素。结论1.急性脑梗死与对照组RAGE-374 T/A基因多态性有差异,RAGE-374A等位基因对急性脑梗死可能具有保护作用；2. RAGE-374T/A基因多态性与急性脑梗死病因分型及有无合并糖尿病无相关性,急性脑梗死合并颈动脉斑块组患者AA纯合子基因型频率低于未合并颈动脉斑块组,提示A等位基因可能对颈动脉粥样硬化具有保护作用；3.急性脑梗死患者血清sRAGE水平显著升高；不同RAGE-374T/A亚型间患者血清sRAGE水平有显著差异,提示RAGE-374T/A基因多态性能够影响sRAGE血清水平;4.急性脑梗死患者EN-RAGE在不同亚组间差异显著,提示EN-RAGE作为促炎症因子,参与颈动脉粥样硬化的发生。