论文部分内容阅读
前言 分娩是一个复杂的生理过程，分娩发动的机制目前尚无定论。传统的观点认为宫颈在分娩过程中处于被动地位，近来通过大量的研究发现宫颈的成熟、扩张也是其自身变化的结果。宫颈主要由结缔组织组成，胶原含量多少决定其坚韧度。分娩时宫颈的成熟、扩张与胶原的降解密切相关，对胶原起降解作用的主要是基质金属蛋白酶(MMPs)。MMPs主要参与孕卵着床、胚胎发育、分娩发动等生理过程。本研究通过对子宫局部组织中MMPs进行测定，以探讨其与宫颈成熟、扩张的关系，为研究分娩发动机制提供了理论、实验依据。 资料和方法 一、资料 无产科并发症和内外科合并症的单胎妊娠初产妇72名，因头盆不称，脐带绕颈，胎儿宫内窘迫行子宫下段剖宫产，有宫缩剖宫产组56例(第一产程组44例，第二产程组12例)，以无宫缩剖宫产组16例为对照组。第一产程组中宫口开大＜3cm组16例，宫口开大3-5cm组14例，宫口开大5-10cm组14例。 二、标本采集 在子宫下段剖宫产时，在子宫切口下缘中点剪下子宫下段组织约2克，用生理盐水冲洗，放入液氮速冻。 三、实验方法 1．室温下将标本解冻。 2．称重0.1克，剪碎，制成10％生理盐水溶液。 3．用超声波细胞破碎机将细胞破碎。 4．在室温下离心15分钟取上清液待用。 5．预实验分别将上清液稀释2倍j0倍J 倍确定将样本稀释32信后待用。 6．加样：用ELISA试剂盒加人标准液，孵育2小时。 7．加酶抗，孵育1小时。 8．显色，孵育30分钟。 9．终止，30分钟内用酶标仪在OD450nm下读数。 四、结果的判定：对所得数据进行单因素方差分析 结 果 一、宫颈扩张不同阶段各组孕妇在年龄、孕龄、胎儿出生体重方面比较无统计学差异p＞o．05八 二、有宫缩剖宫产组子宫下段组织中MMP－9浓度3．05 S 2．64n吵mg明显高于无宫缩剖宫产组 0．76。0．43n砂mg（F＝5．53，P＜0·05）。 三、无宫缩剖宫产组子宫下段组织中MMP—9浓度0．76 L 0．43ng／mg，随产程进展，进人第一产程升高至 2．23。2．02ng／mg厂一8．24，P＜0．01），至第二产程达高峰 6．08。2．53 n牙mg汀一30．抢f＜001）差异有极显著性。 四、进人第一产程随宫口开大MMP—9浓度呈上升趋势，宫口开大＜3cm组 MMP－9浓度 1．45 t 0．65ng／mg，宫口开大 3－5cm组 MMP－9浓度 1．90 ti．14ng／mg，宫口开大5－10cm组MMP－9浓度 3．02。二．15ng／mg，但各组间差异无显著性u分别为3．38、1．56、2．02、P＞o．05）。 讨 论 宫颈主要由结缔组织组成，结缔组织中胶原纤维是其主要成分，约占70％；妊娠中期以后，胶原纤维束松散、断裂，胶原含量减 ·2·少，足月时降至非孕时的1／’3。对胶原起降解作用的主要是由MMPS介导，导致宫颈成熟＊张。MMPS主要参与细胞外基质代谢，可脚细胞外基质中至少一种组成的蛋白酶。MMPS参与许多生理过程，如胚胎发育、分娩发动、产后子宫缩复、子宫内膜周期性剥脱及一些病理过程，如类风湿性关节炎、牙周病、肿瘤侵袭等。胎盘和胎膜中主要的MMPS有l在Js型，宫颈中主要有1在＊。8J型，Adillo－ortega等在妊娠组织提取物中加人抗MMP－9的抗体后发现，可抑制金属蛋白酶活性的50％以上，这表明在分娩发动中起主要作用的是 MMI’－9，宫颈中主要胶原成分为 1型和皿型胶原，而MMP－9的主要作用为降解完整IV型胶原和已经部分降解的1型和皿型胶原。因此本研究采用酶联免疫分析法分别测定分娩不同阶段产妇子宫下段组织中MMP－9的变化，来分析其在产程进展过程中的作用。 Winkler等对子宫下段组织中MMP－9浓度进行研究发现，随宫口扩张，MMP－9浓度上升，从而提出宫颈的成熟、扩张与MMP－9浓度升高有关。Frank等对不同孕龄孕妇羊水中MMP－9浓度进行测定发现，其随孕龄增加而升高，从而认为MMP－9在妊娠进展、宫颈成熟中起重要作用。本研究结果表明子宫下段组织中MMP－9浓度有宫缩剖宫产组明显高于无宫缩剖宫产组，说明MMP－9在分娩过程中的重要作用，子宫下段组织中MMP－9浓度随着宫颈成熟扩张而显著升高。MMP－9浓度与宫颈扩张程度呈正相关，这也说明了分娩期MMP－9活性升高，降解其特异底物成分导致大量胶原组织被分解，表现为宫颈成熟扩张，推动产程进展，我们的实验也证明了这一点。基质金属蛋白酶在分娩发动中的主要作用机制目前尚不完全清楚。关于宫颈组织中MMPS活性升高的原因，naraanr等人认为可能是成熟宫颈组织中性粒细胞的浸润迅速增加，使MMPS基因表达增高，MMPS的表达被许多因子诱导，主要是各种细胞因子和生长因子，Junqueira等用电镜 ·3·观察发现，在宫颈成熟时宫颈中浸润的多形核白细胞（PMN）有脱粒现象，其周围有胶原溶解现象，因此推断宫颈中MMPs可能主要来源于浸?