姬菇多糖纯化及其对小鼠急性肝损伤保护作用研究

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姬菇(Pleurotus cornucopiae)口味鲜美、营养丰富,是我们的日常消费中倍受青睐大宗食用菌,在我国许多地方广泛推广栽培。姬菇含有蛋白质、氨基酸、脂肪、维生素和铁、钙等营养物质。近年的研究表明食用菌具有抑制肿瘤生长、降血糖、抗氧化、抗病毒及调节机体免疫等作用,在医药和功能性食品领域显示了巨大的应用前景。本试验探讨了姬菇多糖的纯化及其对小鼠急性肝损伤保护作用研究。1姬菇多糖的分离纯化及鉴定。通过热水浸提法从姬菇中提取多糖,通过浓缩、乙醇沉淀、干燥等步骤,得到粗多糖(PCNP Ⅰ),然后经过Sevag法脱蛋白、干燥等步骤后得到精多糖(PCNP Ⅱ)。PCNP Ⅱ经DEAE-Cellulose52(?)(?)Sepharose4B柱层析纯化,制备较均一多糖(PCNPⅢ),纯度达到94.37%。首先对PCNP Ⅱ(?)口PCNPⅢ的抗氧化性进行比较,发现当多糖纯度达到90%以上时,其对游离的羟自由基(·OH)具有较好的清除作用。与Vc(?)匕较,它的清除率可接近90%;但对超氧离子(·O2-)清除作用仅为Vc的65%。2以精多糖(PCNP Ⅱ)为试验材料并以小鼠建立酒精性急性肝损伤模型(ACL),进行功能性试验研究。结果表明,连续饲胃30天后,除空白组外,给予50%浓度的乙醇溶液建立小鼠急性肝损伤模型。清晨空腹取血,之后处死小鼠后取肝脏,进行血清学和肝脏抗氧化指标分析研究。结果表明,ACL-PCNP Ⅱ-M组血清中ASL、ALT等肝细胞损伤指标有所改善;而PCNP Ⅱ处理后的肝组织中SOD、CAT活性、GSH含量较模型组和联苯双酯组有所升高、MDA则降低,其中以ACL-PCNP Ⅱ-H组效果较为明显(P<0.01)。3为了进一步证实PCNP Ⅱ的护肝作用,又以CCl4建立肝损伤模型进行验证。连续饲喂胃30天后,除空白组外,给予CCl4(80mg/kg.BW)建立小鼠急性肝损伤模型。清晨空腹取血,之后处死小鼠后取肝脏,进行血清学和肝脏抗氧化指标分析研究。结果表明,给予PCNP Ⅱ-H后,血清中AST、ALT、ALP均较CCl4组有所改善,但小鼠依然处于肝损伤状态;肝组织中SOD、CAT活性、GSH含量较CCl4组有所改善但与联苯双酯组近似,MDA则降低。4酒精性和CCl4肝损伤小鼠的肝组织和细胞显微和超微结构研究。病理学显微结构显示,短时间大量饮酒造成肝细胞肿胀、肝缩变形等现象;CCl4对肝细胞的损伤则更为严重;PCNP Ⅱ组小鼠肝组织细胞的形态得到一定程度的维护。进一步超微结构观察结果,支持了显微结构的定论。
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