哮喘小鼠白细胞介素-13和周期蛋白D1的表达及布地奈德、尼卡地平的干预作用

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目的:研究哮喘小鼠气道及肺组织中白细胞介素-13(IL-13)和周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达情况和对气道平滑肌增生肥厚的影响,探讨布地奈德和尼卡地平对哮喘模型的干预作用;方法:运用卵清蛋白(OVA)致敏和激发的方法,建立哮喘小鼠模型。选择清洁级BALB/c雌性小鼠为实验动物。60只小鼠随机分成空白组、模型组、布地组、尼卡组。观察各组小鼠气道及肺组织HE染色、Masson染色情况,用图形分析软件(Image-Pro Plus,IPP)分析各组小鼠气道平滑肌层厚度(WAm/Pi)变化情况;免疫组化法检测各组小鼠气道以及肺组织中IL-13和Cyclin D1的表达;RT-PCR法检测各组小鼠气道以及肺组织中IL-13mRNA和Cyclin D1mRNA的表达。结果:1.肺组织病理改变:HE染色显示模型组上皮坏死脱落,气道平滑肌明显增生肥厚,上皮下纤维化,大量炎性细胞浸润。Masson染色显示模型组气道及血管周围大量胶原沉积,布地组和尼卡组上述表现明显轻于模型组;2图像分析显示:与空白组(2.56±1.34)相比,.模型组(9.12±2.46)、布地组(3.98±1.62)和尼卡组(6.32±1.59)气管平滑肌厚度(WAm/pi)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);和模型组相比,布地组和尼卡组小鼠WAm/Pi较模型组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);且布地组WAm/Pi显著低于尼卡组,差异有统计学意义(P<0.05);3.免疫组化检测IL-13的表达:与空白组(2.66±1.67)%相比,模型组(8.64±1.83)%、尼卡组(5.06±1.66)%小鼠气道及肺组织IL-13表达增多,差异有统计学意义(P<0.05),布地组(3.61±1.77)%与空白组比较无统计学意义(p>0.05);与模型组相比,布地组和尼卡组IL-13的表达减少,差异有统计学意义(P<0.05);布地组IL-13的表达低于尼卡组,差异有统计学意义(P<0.05);4.免疫组化检测Cyclin D1的表达:与空白组(7.24±2.23)%相比,模型组(21.80±4.95)%、布地组(10.60±3.88)%和尼卡组(14.64±5.48)%小鼠气道及肺组织Cyclin D1表达增高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,布地组和尼卡组Cyclin D1的表达减少,差异有统计学意义(P<0.05);布地组和尼卡组相比,布地组Cyclin D1的表达低于尼卡组,差异有统计学意义(P<0.05);5.PT-PCR检测IL-13mRNA的表达:与空白组(0.09±0.02)相比,模型组(0.61±0.03)、布地组(0.17±0.02)和尼卡组(0.30±0.03)小鼠肺组织中IL-13mRNA的水平增高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,布地组和尼卡组肺组织中IL-13mRNA的水平下降,差异有统计学意义(P<0.05);布地组和尼卡组相比,布地组低于尼卡组,差异有统计学意义(P<0.05);6. PT-PCR检测Cyclin D1mRNA的表达:与空白组(0.30±0.01)相比,模型组(1.30±0.01)、布地组(0.77±0.33)和尼卡组(0.89±0.01)小鼠肺组织中Cyclin D1mRNA的水平增高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,布地组和尼卡组肺组织中Cyclin D1mRNA的水平下降,差异有统计学意义(P<0.05);布地组和尼卡组相比,布地组低于尼卡组,差异有统计学意义(P<0.05);7.模型组Cyclin D1和IL-13蛋白的表达呈正相关(γ=0.702,P<0.05);气道平滑肌厚度与Cyclin D1蛋白的表达呈正相关(γ=0.915,P<0.05);气道平滑肌厚度与IL-13蛋白的表达呈正相关(γ=0.539,P<0.05);结论:1.IL-13和Cyclin D1的蛋白及mRNA在哮喘小鼠气道及肺组织内表达增高,两蛋白表达水平呈正相关,且与哮喘气道平滑肌增生程度呈正相关。2.布地奈德、尼卡地平能降低哮喘小鼠气道及肺组织中IL-13和Cyclin D1的蛋白及mRNA的表达。3.布地奈德对哮喘模型的干预效果优于尼卡地平。
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