前言 肝脏缺血再灌注是外科临床中常常遇到的问题，其不仅导致肝脏损伤，还可引起全身多脏器功能不全甚至衰竭，严重的还可导致死亡。其确切机制仍不十分清楚，一般认为与缺血期间的低氧损伤，再灌注期间血管内皮和肝细胞损伤及继发于内皮细胞损伤的微循环障碍等有关。 而针对该损伤的防护，近年来已进行了大量的实验及临床研究，探索出一系列方式方法，如缺血预处理等各种预处理；各种方式的分流或转流；枯否氏细胞功能及凝血途径的抑制；针对各种促炎性细胞因子的单克隆或多克隆抗体，以及应用各种抗炎性细胞因子的重组物；还有各种药物保护。但能够应用于临床的却很少。 谷氨酰胺(Gln)是一种条件必需氨基酸，近年来逐渐受到重视，广泛应用于小肠相关疾病，骨髓移植，瘀胆和胆石症，创伤及肿瘤等多方面研究。而在脏器缺血再灌注损伤方面，也应用于动物小肠及后肢模型的研究，证明其对脏器有保护作用。本实验小组已证实，术前输入Gln对大鼠肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用。但以上研究均是于术前给药，而Fukatsu等应用小鼠小肠缺血再灌注损伤模型，采用术中缺血时静脉输入Gln的方法，结果证明作用反而是有害的。但术前术中持续给药会对肝脏缺血再灌注损伤产生如何影响，却未见相关报道。所以本实验应用大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型，采用从术前3天开始直到缺血再灌注结束持续给药的方法，观察其对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响。 但游离的Gln不稳定，很难在溶解状态下长期保存。而丙氨酰-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)溶解度高、稳定性好，能耐受热灭菌，静脉输注后在二肽酶作用下迅速分解成游离Gln和丙氨酸。其和Gln具有相同的维持血浆Gln正常水平、改善氮平衡及小肠粘膜形态的作用。本实验即用Ala-Gln代替Gln。材料与方法 雄性Wistar大鼠250一oo克，参照第三军医大学的静脉营养模型，行右侧颈外静脉插管，微量泵输注0.9%Nacl液，ZxnFh，观察1天。然后大鼠随机分为实验组与对照组，实验组给予3%从a~Gln;对照组给予0.9%Nacl液，速度均为ZmFh，连续输注直到缺血再灌注结束。于插管后第四天开腹，Prin砂e法建立门静脉淤血的肝脏缺血再灌注模型，至缺血40分钟后去除血管夹恢复肝脏血流，再灌注1小时后分别自门静脉抽血2血，赏试剂比浊法测定细菌内毒素(endoto劝n，ET);自主动脉抽血3而，用全自动生化分析仪测定动脉血清生化酶(ALT，AST，LDH)水平;取小块右叶肝组织，置于10%中性福尔马林中固定，sP免疫组化方法测定肝组织细胞间猫附分子(intercellulara曲esion molec过e一1，IcAM一l)表达情况。血清内毒素，生化酶的数值以又士s表示，t检验方法进行统计学检验;肝组织ICAM一1结果用行x列表精确概率法进行统计学检验。所有数据资料均采用SPSS软件进行处理。P<0.05视为差异有显著性。结果 1.门静脉血中内毒素水平:实验结果显示肝缺血40分钟，再灌注1小时后，实验组与对照组内毒素水平分别为0.3229土0.0756EU/血及0.2021士0.0495EU/血，有显著性差异(P<0.01)。 2.主动脉血中生化酶水平:实验结果显示肝缺血4O分钟，再灌注1小时后，实验组与对照组ALT水平分别为407 .29土84 .27U/l及3 12.67土“.48U/l，有显著性差异(P<0.05);AST水平分别为1159. 57士619.21U/l及79 1 .17士343 .61U/l，无显著性差异(P>0.05);LDH水平分别为5600.43土1 895.87U/l及5830.57土1828.90U/l，无显著性差异(P>0.05)。 3.肝组织ICAM一1表达:统计结果表明，肝缺血再灌注后IcAM一l在肝脏的表达，实验组较对照组明显增强(P<0 .05)。讨论 Gln是机体内含量最为丰富的氨基酸之一，应激状态下，机体Cln库被大量消耗，与此同时其它组织器官对血中Gln的摄人增加，反而使血浆Gln浓度下降，因此，机体对Gln的需要量大大增加了。此时，补充外源性Gln是有益的，能对组织损伤起到保护作用。 多数研究表明，外源性G玩主要是通过提供谷氨酸组分，增加组织中谷胧甘肤含量而对器官损伤起到保护作用的。另外，Gln还可通过其它途径发挥对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用，如增加细胞膜的稳定性;刺激肝糖原生成，提高肝细胞糖原储备;Gln还是嚷岭、嚓吮、核酸等合成的重要底物和前体;G】n还可通过保护肠道屏障功能，防止细菌毒素及细胞因子移位激活肝枯否氏细胞等而发挥对肝脏的间接保护作用。 本实验采用从术前3天开始直到缺血再灌注结束持续给药的方法，结果表明实验组ET、ALT、IcAM一1三项指标均显著高于对照组，而AST及LDH水平两组间无显著性差异，说明该方法给药对大鼠肝脏缺血再灌注损伤可能是有害的。 「〕静脉淤血时，肠戮膜通透性增加，屏障功能减弱，导致细菌内毒素等移位至门静脉血中。而I幼是维持钻膜免疫功能及屏障完整性的重要组成成分，在动物模型，肠道I必水平与细菌过度生长、移位及肠道通透性改变成负相关。IL4和IL一10能够促进I幼的合成，而术前静脉输人Gln可以维持IL4和IL一10的表达从而促进I幼的合成以保护肠钻膜屏障。本实验中实验组较对照组E