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目的:观察LMP1基因对鼻咽癌细胞CNE1增殖、侵袭及转移能力的影响;对比脂筏完整性破坏前后,CNE1-LMP1细胞中脂筏相关蛋白的表达及体外侵袭、转移能力的变化,探求鼻咽癌侵袭、转移机制的新线索。方法:1.以人鼻咽癌细胞株CNE1、CNE1-LMP1为研究对象,Western Blot验证LMP1(Latent membrane protein 1)在两株细胞中的表达,CCK8法、Transwell小室实验对比稳定转染LMP1后的鼻咽癌细胞增殖、侵袭、转移能力的变化;2.通过CCK8法及细胞胆固醇含量测定试剂盒分析不同浓度、不同时间点MβCD作用于CNE1-LMP1细胞后其细胞活性及细胞内胆固醇含量的变化,并寻求MβCD作用的最佳浓度和时间,建立合适的脂筏破坏模型;3.利用Western Blot和RT-PCR实验检测鼻咽癌细胞CNE1-LMP1细胞株在MβCD处理前后,caveolin-1和LMP1在蛋白水平和m RNA水平表达量的变化,探究脂筏完整性对于鼻咽癌细胞膜表面脂筏相关蛋白的表达水平的影响;4.Transwell小室侵袭、转移实验观察MβCD处理后的鼻咽癌细胞CNE1-LMP1体外侵袭、转移能力的变化。结果:1.CNE1-LMP1细胞株可稳定高表达LMP1;CNE1-LMP1细胞的增殖、侵袭、转移能力较CNE1明显增强,存在统计学差异(P<0.05)。2.MβCD的作用时间控制在1h内,浓度为2.5m M、5m M、10m M时,各药物组的细胞生存率与对照组相比,虽略有下降,但无显著差别(P>0.05);当MβCD处理细胞的时间延长到2h的时候,随着药物浓度的升高,MβCD组中细胞的生存率随药物浓度的升高呈直线下降趋势,且存在统计学差异(P<0.05)。3.根据CCK8结果,将MβCD作用时间固定在1h,三个浓度药物组细胞的胆固醇含量随着MβCD浓度升高而下降,且各处理组间胆固醇浓度的差异具有统计学意义(p<0.01)。4.10 m M的MβCD作用于CNE1-LMP1细胞1h后,无论是caveolin-1还是LMP1,在蛋白和m RNA水平的表达均受到影响,发生了明显的下降(P<0.01)。5.10 m M的MβCD作用CNE1-LMP1细胞1h后,transwell小室实验的结果显示,穿入到下室的细胞数明显减少,侵袭、转移能力受到一定程度的影响和抑制,检测结果的差异存在统计意义(P﹤0.01)。结论:LMP1基因在鼻咽癌细胞中的高表达,可增强鼻咽癌细胞增生能力,促进癌细胞在体外的侵袭和转移。MβCD能够消耗质膜胆固醇,破坏细胞膜脂筏结构的完整性,降低脂筏标记蛋白caveolin-1在蛋白水平和m RNA水平的表达,并扰乱脂筏微域的信号转导等功能。脂筏的破坏,导致细胞膜表面与脂筏及鼻咽癌转移密切相关的LMP1在蛋白和m RNA表达水平的下降,并抑制鼻咽癌细胞CNE1-LMP1体外侵袭、转移能力。