柑橘中类胡萝卜素的提取、分离、鉴定及其稳定性研究

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本文研究了柑橘中类胡萝卜素的提取、分离、纯化条件以及稳定性,研究结果为柑橘汁的工业化生产及贮藏、运输提供理论基础和应用参考。通过有机溶剂提取柑橘中类胡萝卜素,确定了最佳提取条件为:石油醚:丙酮=1:1物料比1:20,温度为40℃,提取次数为2次,浸提时间120min。本研究建立了类胡萝卜素的分析方法,包括薄层层析法、柱层析、高效液相色谱和液质联用法。柱层析使用氧化镁.硅藻土(1:2,w/w)填料,采用丙酮:石油醚为3:7和1:1两个不同比例的有机溶剂洗脱,结合高效液相色谱(HPLC)法,色谱条件为:色谱柱hypersilODS2柱(200mm×4.6mmi.d.),流动相乙腈:甲醇:二氯甲烷(85:13:2),在此条件下,分离得到了9种类胡萝卜素。考虑到类胡萝卜素在分离纯化过程中易降解,为了得到更加可靠的信息,使用了液质联用分析类胡萝卜素,质谱条件:APCI+离子源,离子源温度150℃,m/z(500—800),YMCC30色谱柱(150mm×4.6mmi.d.),流动相A乙腈:甲醇(75:25),B100%MTBE,流速1ml/min。梯度洗脱程序:0min 95%A,5%B;9min 86%A,14%B;19min 75%A,25%:34min 50%A,50%;40min95%A,5%B;50min 95%A,5%;流速1ml/min,检测波长450nm,柱温25℃,在此条件下,鉴定了10种类胡萝卜素。植物组织中含氧类胡萝卜素通常和脂肪酸以酯的形式存在,通过HPLC检测未皂化的类胡萝卜素,发现了约7种酯化的类胡萝卜素,具体和何种脂肪酸以何种方式结合,有待进一步的研究。柑橘中类胡萝卜素的稳定性实验表明:类胡萝卜素在高温下不稳定;对室外日光、紫外光不稳定,对室类光影响不大;在碱性环境中相对比酸性要稳定;加入金属离子如Fe3+、Fe2+、Cu2+、Al3+不稳定,其他金属离子影响不大;加入氧化剂有破坏作用,加入还原剂影响不大且能起到一定保护色素的效果。
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