DWF4影响茉莉素信号及其内含子调控基因表达的研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:woshiwl0000
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芸苔素是一类重要的植物内源激素,调控植物的生长发育以及对环境胁迫的反应。DWF4是芸苔素生物合成中的一个重要基因。为了深入探讨DWF4基因表达的调控原理以及芸苔素生物合成与茉莉素信号传导之间的关系,本研究以模式植物拟南芥为实验材料,进行了以下两个方面的工作:1.芸苔素生物合成对茉莉素信号传导的影响同时用芸苔素生物合成抑制剂和茉莉素处理拟南芥与单独用茉莉素处理相比,发现野生型拟南芥Col-0对茉莉素更敏感,而茉莉素信号传导突变体coil-2也能部分恢复对茉莉素的敏感性,说明芸苔素生物合成受阻能增强茉莉素的信号传导。另外,比较了芸苔素生物合成和茉莉素信号传导双突变体dwf4coil-2与茉莉素信号传导单突变体coil-2的育性,发现dwf4coil-2的可育果荚率明显高于coil-2,说明DWF4影响茉莉素调控的植物育性。2.内含子对DWF4基因的表达影响.,分别将拟南芥DWF4基因的cDNA和基因组DNA克隆到pMYC2载体中,构建了pMcD4和pMD4转化载体,经农杆菌介导法转入拟南芥dwf4突变体。从T2代中筛选出单拷贝转基因株系,分别命名为TcD4和TgD4。通过观察发现两种转基因植株都能恢复dwf4的表型,但TcD4只能部分恢复,而TgD4则能完全恢复;同时采用RT-PCR从分子水平检测到TgD4株系中DWF4的表达量显著地高于TcD4株系,说明DWF4基因的内含子能增强基因表达。
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