维生素B6(VB6)是维持人体正常生理代谢所必需的营养素,主要辅酶形式为磷酸吡哆醛(Pyridoxal-5’-phosphate,PLP),PLP催化着涉及氨基酸的多种代谢反应,其动态平衡及合成是VB6营养的核心问题,与人类多种神经疾病相关。磷酸吡哆醛激酶(Pyridoxal kinase,PLK)和磷酸吡哆醇氧化酶(Pyridoxine phosphate oxidase,PNPO)是PLP的合成酶,维持着哺乳动物细胞和组织内PLP的动态平衡。酶的调节一般从结构水平和合成水平两个方面进行研究,结构水平已经研究的比较透彻,而合成水平如转录翻译等方面还需深入,合成水平的调节有多种方式,激素是主要的途径,但激素对PLP和VB6方面的调节还未见报道。家蚕由于5龄末期大量合成丝蛋白,氨基酸代谢旺盛,PLP需要量增加,因此其合成酶可能受到激素的调控。家蚕生长过程中主要受到保幼激素(Juvenile hormone,JH)与蜕皮激素(20-hydroxyecdysone,20-E)的调控。本研究采用实时荧光定量PCR(Realtime quantitative PCR,RT-q PCR)测定了经不同剂量的20-E和保幼激素类似物(Juvenile hormone analogue,JHA)处理后家蚕PLK、PNPO的表达,并观察激素对家蚕生长发育经过的影响,还对5龄后期家蚕经20-E处理的脂肪体进行了转录组学分析,探讨20-E对家蚕代谢通路的影响。主要结果如下:1.在5龄前期用低剂量的20-E处理家蚕延迟其生长发育经过,而高剂量的20-E处理5龄前期家蚕导致其生长不正常最后死亡。在中后期用20-E处理家蚕缩短发育经过;5龄前中期家蚕经过JHA处理后,发育经过有不同程度的延长,5龄后期家蚕经JHA处理后无显著变化。2.在20-E能提高5龄前期家蚕丝腺中PLK和PNPO的转录水平,对5龄后期它们的转录水平无影响;5龄后期家蚕幼虫经JHA处理后降低了丝腺中PLK和PNPO的转录水平,而JHA处理5龄前期家蚕后,丝腺中它们的转录水平无显著变化。20-E提高了5龄前期家蚕脂肪体中PNPO的转录水平,但对5龄后期PNPO的转录水平有阻碍作用。JHA在5龄前、中期处理家蚕48 h后,脂肪体PLK的转录水平明显降低,但对5龄后期幼虫,JHA使脂肪体中PLK的转录水平下降,却提升了PNPO的转录水平。3.对20-E处理的5龄5天家蚕脂肪体进行转录组测序,并与未被处理的家蚕进行比对,得到606个差异基因。对这些差异基因进行GO分析,发现显著性富集的GO term大都集中在生物学过程方面,尤其是各种代谢过程;Pathway分析表明富集的代谢通路大都与新陈代谢、免疫系统相关。本研究明确了20-E和JHA对家蚕PLK和PNPO的调节作用,为进一步分析PLP的动态平衡及VB6的代谢工作奠定基础,为人类VB6的营养问题提供参考。