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目的：肝再生增强因子（ALR）是从新生大鼠肝组织中克隆到的一种肝增殖刺激因子，能特异地刺激肝细胞增殖，是肝再生的重要调控因子，能提高中毒性肝损伤动物的存活率，在肝损伤修复过程中发挥作用。本研究拟构建ALR与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）融合蛋白真核细胞表达载体，将GFP基因作为标记基因，以基因治疗的方式，观察ALR基因给予CCl4诱导的肝损伤大鼠后，绿色荧光蛋白在肝组织和其它组织内的表达情况，肝组织病理及肝损伤的恢复情况等，探讨ALR基因对急性肝损伤的保护作用，以期为ALR临床救治急性肝病提供理论依据和新的治疗方法。 方法：以本室保存的质粒pBV-220-ALR为模板，用合成的引物进行PCR扩增，扩增条件为94℃预变性5min，94℃变性30sec，50℃退火20sec，72℃延伸10sec，30个循环结束后72℃延伸10min，PCR扩增产物经低熔点琼脂糖凝胶回收纯化，并经EcoR Ⅰ及Sal Ⅰ双酶切后，与相同酶切的真核高效表达载体pEGFP-C2进行体外定向重组，连接产物转化感受态E.coli DH5α。于含卡那霉素的LB培养基筛选重组子，对阳性重组子进行酶切鉴定和测序。测序使用Sanger双脱氧末端中止法。鉴定正确后，进行重组质粒的大量抽提并纯化，紫外分光光度计测OD260定量。取大鼠48只，按2ml／kg腹腔注射50％CCl4（1体积CCl4：1体积豆油），进行肝损伤模型