目的：(1)探讨人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin，hCG)对人卵巢癌细胞株3AO细胞体外增殖及凋亡的调控作用。(2)建立培养细胞的酶受体分析法(enzyme receptor assay，ERA)，采用ERA研究3AO细胞LH/hCG受体特性。(3)研究hCG对3AO细胞内3′，5′-环磷酸腺苷(cyclic adenosine 3′,5′-monophosphate，cAMP)、钙调蛋白(calmodulin,CaM)含量及蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)活性的影响。(4)初步分析了hCG对3AO细胞内类胰岛素生长因子-1(insulin-like growth factor-Ⅰ，IGF-Ⅰ)、凋亡基因bcl-2和bax在蛋白质和mRNA水平表达的影响，探讨hCG信号在癌细胞增殖凋亡中的作用机理。 方法：选用人卵巢癌细胞株3AO进行体外培养，实验组中加入含不同浓度的hCG培养液，对照组不加hCG。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长率，流式细胞术(flow cytometry，FCM)测定细胞周期；荧光显微镜和FCM检测hCG对顺铂介导的3AO细胞凋亡的影响；以人卵巢癌细胞株SKOV-3作为阴性对照，应用ERA测定3AO细胞膜上LH/hCG受体的最大结合容量(Bmax)和亲和力(Kd)；细胞内cAMP、CaM含量和PKC活性分别用放免法、磷酸二酯酶(phosophodiesterase，PDE)法和Promega公司PepTag非同位素检测试剂盒测定；FCM间接荧光技术和定量RT-PCR分析细胞内IGF-Ⅰ、凋亡基因bcl-2和bax在蛋白质和mRNA水平的表达。 结果：(1)hCG浓度为0.1、1μg/ml时能明显促进3AO细胞生长(P四川大学博喇士学位论文<0.05)，10协留mlhCG几乎没有作用，当浓度增加到100林留ml时对细胞生长有明显的抑制作用(尸<0.05)。其中1协创ml浓度的hCG促生长作用最强(P<0.01)，生长率达121%。(2)hCG可使3AO细胞中G。及G;期的细胞由83.77%减少到79.34%一7022%，S期细胞变化不明显，G:及M期细胞由15.45%增加到17.86%一29.14%。同时，hCG明显抑制顺铂介导的3AO细胞凋亡，最大抑制率为10.4%(尸<0.05)。(2) ERA测得3AO细胞L}I月ICG受体的Bmax为142.4n留mg蛋白，亲和力Kd值为16.142n岁ml，未标记配体hcG抑制LH/hcG受体对HRP一hcG特异结合的Ieso为3.554林g/ml。(3)hCG处理引起3Ao细胞内eAMp含量增加，增加程度与hCG有剂量和时间依赖性，而细胞内PKC活性只有轻度增加，CaM含量不发生变化。(4)在hCG处理的3AO细胞中IGF一I表达增加;be卜2和bax基因mRNA和蛋白表达没有明显改变，bd一2乃ax比值也没有明显改变。 结论:(1)hCG对人卵巢癌细胞株3AO细胞的增殖具有明显的促进作用，并通过抑制顺铂介导的细胞凋亡影响卵巢癌细胞的药物敏感性。(2)竞争结合实验、受体结合的特异性实验、饱和结合实验证明3AO细胞上存在特异性的Ll壬七CG受体。(3) 3AO细胞LH小CG受体主要激活腺昔酸环化酶(AC)/环磷酸腺营(cAMP)系统，而不能激活肌醇磷脂(PI)信号系统。(4) hCG在体外促进卵巢癌细胞生长增殖、抑制顺铂介导的3AO细胞的凋亡等作用可能与IGF一I的上调有关，hCG不改变凋亡基因bcl一2和bax的表达。 本研究为揭示LH爪CG受体的异质性与其特定功能的关系，以及hCG及其受体在卵巢癌发生与发展中所起的作用及其作用机制提供了初步的实验依据。