背景黑色素瘤(Melanoma)作为一种皮肤性恶性肿瘤,寻找一种有效的治疗方法仍然是人们研究的重点。匹莫齐特(Pimozide),作为一种治疗急、慢性精神分裂症的药物,早在1979年就被证实具有一定的抗黑色素瘤作用,但效果有限。随着免疫学的进展,化学疗法联合肿瘤免疫治疗受到了人们更过的关注。CpG ODN做为TLR9受体激动剂,课题组前期已经证实其能够提高机体的抗肿瘤免疫反应。因此,本实验将对CpG ODN联合Pimozide的抗黑色素瘤作用进行研究。目的探讨Pimozide联合CpG ODN抗小鼠黑色素瘤的作用,并对其机制进行初探。方法将生长状态良好的黑色素瘤细胞按照1×10~6/只的剂量建立小鼠黑色素模型,模型建立后第7天,随机将小鼠分为:PBS组、Pimozide组、CpG ODN组及Pimozide联合CpG ODN组。CpG ODN每隔一天注射一次,Pimozide每天注射一次,共治疗一周。最后一次治疗后7天,每组随机处死5只小鼠,收集小鼠的脾脏及肿瘤组织。记录小鼠肿瘤大小,Western blot检测肿瘤组织中MMP2、p-STAT5、CD4及CD8的表达,免疫组化检测肿瘤组织中CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞的浸润情况,流式细胞仪检测脾脏中中CD4~+T、CD8~+T及NK1.1淋巴细胞的表达情况。之后,再次建立小鼠模型并治疗,记录小鼠生存期。结果1.Pimozide联合CpG ODN显著地提高了黑色素荷瘤小鼠的生存期,抑制了肿瘤的生长;2.Western blot结果显示,Pimozide联合CpG ODN减少了黑色素肿瘤组织中MMP2及p-STAT5的表达;3.Western blot结果显示,Pimozide联合CpG ODN增加了黑色素肿瘤组织中CD4与CD8分子的表达;4.免疫组化结果显示,Pimozide联合CpG ODN增加了黑色素肿瘤组织中CD4~+及CD8~+T淋巴细胞的浸润;5.流式结果显示,Pimozide联合CpG ODN增加了脾脏中CD4~+T、CD8~+T及NK1.1淋巴细胞的比率。结论Pimozide联合CpG ODN能够有效地抑制小鼠黑色素瘤的生长,延长黑色素荷瘤小鼠的生存期,增加了黑色素荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫反应。该实验为临床上寻找到一种新的黑色素瘤治疗策略提供了一定的理论及实验依据。