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本论文将核酸适配体的高亲合力、强特异性与固相微萃取(Solid-phasemicroextraction, SPME)技术高效、快速、易于操作等优点结合起来，在硅烷化石英纤维表面制备一层多孔聚合物涂层，将氧化石墨烯通过化学键合修饰到多孔聚合物涂层上，再通过化学键合将核酸适配体固载到氧化石墨烯涂层上，研制一种新型腺苷适配体/氧化石墨烯/多孔聚合物涂层固相微萃取纤维，将基于该纤维的SPME方法与液相色谱质谱(LC/MS/MS)联用，建立复杂生物样品中痕量腺苷高选择性、快速分析方法，论文主要内容如下:
1.介绍了固相微萃取技术，综述了SPME技术的基本理论、装置、萃取模式、涂层，综述了适配体的结构特点、固定方法以及适配体的应用，综述了石墨烯和氧化石墨烯的结构特点、制备方法、键合方法及其应用。
2.开展了腺苷适配体/氧化石墨烯/多孔聚合物涂层萃取头的制备及表征。采用改进的Hummers法制备氧化石墨烯，通过原子力显微镜、透射电镜、红外光谱图对其进行结构性能的表征。然后以石英纤维为底材，采用多次聚合的方法制备多孔聚合物纤维涂层，涂层均匀致密，平均厚度为3.8μm(n=6)，相对标准偏差为2.8％。再将通过共价键合的方法将氧化石墨烯固定在多孔聚合物涂层上，并对其键合条件及键合方案进行了优化，根据优化条件制备涂层，其平均厚度为5.8μm(n=6)，相对标准偏差为8.5％。红外光谱图表明，与空白纤维相比涂渍后出现了氧化石墨烯的特征峰。扫描电镜显示涂层表面氧化石墨烯均匀致密，覆盖率达100％。再采用化学键合的方法将腺苷适配体固定到氧化石墨烯涂层表面，并优化了键合条件:键合缓冲液、EDC与NHS比例及总体积分数，键合时间。然后通过Oligreen荧光染料法测定适配体荧光强度，计算适配体键合量，在最优条件下测定适配体键合量为0.129μg(n=6)，键合率达到51.1％，相对标准偏差为8.5％。
3.开展了腺苷适配体/氧化石墨烯/多孔聚合物涂层萃取性能及其应用研究，优化了萃取条件:萃取溶剂、Mg2+浓度、萃取时间、搅拌速度、解吸液、解吸时间，根据最优的萃取条件对其萃取容量进行了研究，得到最大萃取量为4.56 ng。然后采用乱序腺苷适配体和空白氧化石墨烯/多孔聚合物涂层为对照物，对其进行选择性研究，其对5种腺苷结构类似物的选择性因子为7.0-14.0，表明腺苷适配体结构中存在特定识别腺苷的碱基位点，对腺苷及其结构类似物具有选择性识别能力。建立腺苷适配体/氧化石墨烯/多孔聚合物涂层-SPME-LC/MS/MS联用测定腺苷的分析方法，线性范围为0.002-0.100μg/mL，检出限为0.0012μg/mL。以1.0μg/mL腺苷标准溶液为对象考察，精密度相对标准偏差为7.4％(n=6)，该方法测定浓度为0.01μg/mL及0.05μg/mL的加标血清样品中腺苷，回收率分别为91.4％、83.2％。