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大肠癌包括结肠和直肠癌，是我国常见恶性肿瘤之一。它的发生是一个多步骤、多基因改变积累的结果。在这个过程中，除了癌基因的激活、抑癌基因的失活，生长因子的失调控也起了重要作用。 转化生长因子β1（Transforming Growth Factor-β1，TGF-β1）是一种多功能生长调节因子，对上皮起源的细胞具有普遍生长抑制作用，并能诱导正常结肠上皮细胞凋亡。实验研究发现，TGF-β1无论在体内或体外均显示了抑癌作用。转化生长因子βⅡ型受体（Transforming Growth Factor β Type ⅡReceptor，TβR-Ⅱ）是存在于细胞表面上的跨膜糖蛋白，能够识别并与TGF-β1结合，转导TGF-β1的生物学活性。TβR-Ⅱ基因是一个抑癌基因，它的突变导致细胞失去对TGF-β1抑制反应，有助于大肠癌的发生。 本实验采用RT-PCR法对40例大肠癌组织及对应正常黏膜组织TGF-β1和TβR-ⅡmRNA进行检测，并对肿瘤组患者按不同的临床病理参数分组，研究大肠癌TGF-β1和TβR-ⅡmRNA的表达与各参数间的关系，了解其对大肠癌的诊断及预后判断的价值初步探讨大肠癌细胞逃避TGF－尸；负调控的可能机制，为进一步了解 TGF－DI和 TGF－D R刁在大肠癌形成中的作用提供依据。 二．实验对象 标本取自2000年2月至2000年1二月浙江大学医学院附属第一医院肛肠外科手术切除的40例大肠癌组织和癌旁正常组织（远切缘正常组织，病理证实无肿瘤浸润）。其中男24例，女16例；平均年龄56．65岁。所有病例均经病理证实，按1978年我国第一次大肠癌科研协作会议提出改良Dukes分期：A期川例，B期9例，C期12例，D期9例。 2．实验方法 2．IRT—PCR法 以Trizol Reagent按一步法提取组织总RNA，提取出的RNA经凝胶电泳和紫外分光光度计鉴定其质量及含量。逆转录合成CDNA，分别PCR扩增TGF－日1和B－actin、TpR－11和p－actin。 2．2电泳和结果观察 PCR产物经琼脂糖凝胶电泳，在紫外透射仪上观察，出现 160hP（TGF－DI）、224hp（i－actin）、342hp（TfiR－11）条带为目的产物。采用 Kodak DigitalScience ID图象分析软件进行分析，读取阳性条带的光密度值，分别计算TGF－PI禾 TPR－IImRNA指数（RI），RI＝TGF－DlmRNA或TDR－IImRNA RT－PCR产物光密度值／D－ac上in InRNA RT－PCR产物光密度值。 3．统计学方法 以SPSS 10．0统计软件进行T检验和秩和检验。P＜0．05认为有统计学意义。 〕 4．实验结果 4．ITGF－民。RNA在大肠癌及癌旁正常组织的表达 40例大肠癌及癌旁组织经 RT－PCR扩增均得到 160hP（TGF 81）和 224hP（8－ac t in）阳性条带。空白对照组相应条带缺如。大肠癌组织TGF－s；。MA指数为0．954士0。244，癌旁正常组织为0。802士0．253，癌组织TGF 8 lffiRNA指数显著高于癌旁组织(P（．01）。 侵润深度为 T3／T4的大肠癌组织 TGF－if IRNA指数明显高于侵润深度为TI八 者。有淋巴结转移大肠癌组织TGF－民 mRNA指数明显高于无淋巴结转移者；有远处转移的大肠癌组织兀卜61帕M指数明显高于无远处转移者；hhes分期为 C／D期的大肠癌组织 TGF－sl iRNA指数明显高子分期为 A／B期者（P＜0．05）。大肠癌组织TGF－DI inyA指数高低与细胞分化无关（P＞0、05）。 4．2 TpR－11。RNA在大肠癌及癌旁正常组织的表达 33例大肠癌及 40例癌旁组织经盯－PCR扩增均得到 342hP（T D R－11）、224hP （8－actin）阳性条带。7例大肠癌组织仅有224hp（p－actin）阳性条带，342hP（T p R－11）条带缺如。空白对照组相应条带缺如。大肠癌组织叩 R－11 PRNA指数为0、9兆（中位数），癌旁正常组织为L”O（中位数），癌组织T朋－H。捌A指数显著低于癌旁组织（P＜0．01）。 侵润深度为 T3／T4的大肠癌组织” R－11。RNA指数明显低于侵润深度为TI／TZ者；有淋巴结转移大肠癌组织” R－11 mRNA指数明显低于无淋巴结转移者；DukeS分期为C／D期的大肠癌组织TDR－IImRNA指数明显低于分期为A／B期者（P＜0．05）。大肠癌组织祁 R二 nRNA指数高低与有无远处转移、细胞分化无关（P＞0．05）。 5．结论 大肠癌组织TGF e 11RNA水平明显高于癌旁正常组织深度、有无淋巴结转移及远处转移、Dukes分期密切正相关；其表达水平与侵润而与细胞分化无关。大肠癌组织 T fi R－11 mRNA水平明显佩于癌旁正常组织；其表达水平与侵润深度有无淋巴结转移、Dukes分期密切负相关，而与及远处转移、细胞分化无关。