SOCS1/3对TLR3、Tfh细胞分化的调控及其在HT中的作用

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目的:1.通过检测HT患者甲状腺组织中SOCS1/3、TLR3蛋白的表达及外周血中SOCS1/3、TLR3mRNA的表达,探讨SOCS1/3、TLR3在HT发病中的作用及具体机制;2.通过检测HT患者外周血中Tfh细胞占淋巴细胞的百分比和特征性转录因子Bcl6mRNA的表达,探讨Tfh细胞在HT中的作用;方法:1.选取30例HT患者、10例GD患者及10例正常的甲状腺组织标本,采用免疫组化法(IHC)检测SOCS1/3及TLR3蛋白在各组甲状腺组织的表达与定位,并对结果进行半定量评分;2.收集30例HT患者、30例GD患者及30例正常人的外周血,Ficoll密度梯度离心法分离PBMC,提取PBMC中总RNA,实时荧光定量PCR检测SOCS1/3、TLR3mRNA的表达量;3.流式细胞术检测30例HT患者、30例GD患者及30例正常人外周血中CD4+CXCR5+T细胞(Tfh细胞)占淋巴细胞的百分比;Ficoll密度梯度离心法分离外周血PBMC,实时荧光定量PCR检测Bcl6mRNA的相对表达量;结果:1.TLR3蛋白在GD组及正常组甲状腺组织几乎不表达,在HT组主要表达部位在滤泡上皮细胞的胞浆内,且HT组表达量明显高于GD组及正常组,差异有统计学意义(P<0.05);2.SOCS1/3蛋白在GD组、正常组甲状腺组织中有少量表达,主要表达部位在滤泡上皮细胞的胞浆,而在HT组的表达较GD组及正常组明显,差异有统计学意义(P<0.05);3.外周血PBMC中TLR3、SOCS1/3 mRNA的相对表达量在HT组均高于GD组和正常组,差异有统计学意义(P<0.05);4.HT组患者外周血中Tfh细胞百分比高于GD组及正常组,差异具有统计学意义(P<0.05),HT组外周血PBMC中Bcl6mRNA的相对表达量高于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05);5.HT患者外周血PBMC中SOCS1mRNA的相对表达量与血清TGAb水平呈负相关(r=-0.393),与TPOAb、FT3、FT4、TSH均无相关性(均P>0.05);6.HT患者外周血PBMC中TLR3、SOCS3mRNA的相对表达量与血清TGAb、TPOAb、FT3、FT4、TSH均无相关性(均P>0.05);7.HT组患者外周血中Tfh细胞的比例与血清中自身抗体TGAb水平呈正相关(r=0.380),与TPOAb水平呈正相关(r=0.374),与FT3、FT4、TSH均无相关性(P>0.05);HT组外周血PBMC中Bcl6 mRNA的相对表达量与TGAb、TPOAb均无相关性(P>0.05);8.SOCS1与TLR3蛋白在HT患者甲状腺组织中的表达无相关性(P>0.05);SOCS3与TLR3蛋白在HT患者甲状腺组织中的表达无相关性(P>0.05);9.HT患者外周血PBMC中SOCS1与TLR3mRNA的表达量呈正相关(r=0.586);而SOCS3与TLR3 mRNA的表达无相关性(P>0.05);10.HT组SOCS1/3 mRNA的相对表达量与Tfh细胞比例均无相关性(均P>0.05);HT组SOCS1/3 mRNA的相对表达量与Bcl6mRNA表达均无相关性(均P>0.05);结论:1.HT患者外周血及甲状腺组织中TLR3、SOCS1/3的表达量较对照组升高,提示TLR3和SOCS1/3都可能参与HT的发生;2.HT患者外周血中Tfh细胞比例、Bcl6mRNA表达量较对照组升高,提示Tfh细胞可能参与了HT的发病;3.HT患者外周血Tfh细胞百分比与自身抗体TGAb、TPOAb滴度呈正相关,提示Tfh细胞可能与HT患者B细胞产生自身抗体有一定关系;
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