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目的:肝脏缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,IRI)影响肝移植的效果,多种机制参与该过程,其中,库普弗细胞(Kupffer cells,KCs)通过调控肝脏免疫排斥反应在肝脏IRI中发挥重要作用,但其具体机制还有待进一步探讨。辛二酰苯胺异羟肟酸(Suberanilide hydroxamic acid,SAHA)是一种广谱的组蛋白去乙酰化酶抑制剂,研究表明SAHA能够有效抑制巨噬细胞的炎症水平,并能够通过AKT/m TOR通路诱导多种细胞自噬,但其在肝移植诱导的肝脏IRI中的作用尚不清楚。本研究采用SAHA对大鼠肝移植后IRI模型进行干预,探讨SAHA在该模型中的作用,为IRI药物治疗奠定一定的理论基础。方法:1采用雄性Sprague Dawley(SD)大鼠构建肝移植后IRI模型。SD大鼠随机分为6组:1.假手术组(Sham组);2.缺血再灌注组(IR组);3.IR+DMSO组;4.IR+SAHA组;5.IR+SAHA+CL组;6.IR+SAHA+CQ组。于再灌注24 h获取各组大鼠外周血及肝脏组织,提取肝组织及KCs总蛋白,检测炎症因子,凋亡相关蛋白以及AKT/m TOR通路蛋白水平,检测肝脏组织病理改变及肝细胞凋亡情况。提取正常SD大鼠KCs,随机分为6组:正常组(Normal组)、LPS组、LPS+Scramble-si RNA组、LPS+DMSO组、LPS+SAHA组、LPS+SAHA+ATG5-si RNA组,流式细胞仪检测各组M1型KCs比例,免疫荧光检测各组自噬标志物LC3B的表达情况,透射电子显微镜检测KCs自噬小体,提取各组蛋白及m RNA,检测自噬相关因子,炎症因子,AKT/m TOR通路活化水平。结果:体内试验中,与IR+DMSO组(743.60±90.64 U/L)相比,SAHA处理组(423.60±95.81 U/L)转氨酶水平明显降低(n=5,P<0.05),肝细胞凋亡情况(IR+DMSO:129.70±13.21,IR+SAHA:42.67±9.71,n=3,P<0.05)也明显减轻,并显著抑制炎症蛋白IL-1β(IR+DMSO:0.61±0.05,IR+SAHA:0.22±0.02,n=3,P<0.05),TNF-α(IR+DMSO:0.52±0.03,IR+SAHA:0.24±0.04,n=3,P<0.05),P65(IR+DMSO:0.59±0.06,IR+SAHA:0.28±0.06,n=3,P<0.05),促进自噬蛋白LC3B(IR+DMSO:0.19±0.05,IR+SAHA:0.68±0.07,n=3,P<0.05),ATG5(IR+DMSO:0.16±0.04,IR+SAHA:0.61±0.06,n=3,P<0.05)表达,同时抑制P62水平(IR+DMSO:0.60±0.04,IR+SAHA:0.18±0.06,n=3,P<0.05),HE结果表明,SAHA缓解缺血再灌注肝脏中细胞炎症及水肿情况,加入CL抑制KCs功能后,SAHA对肝脏的保护作用被明显削弱(IR+SAHA:3.21±0.45,IR+SAHA+CL:6.19±0.35,n=5,P<0.05)。体外实验中,SAHA有效促进KCs中自噬小体的形成(IR+DMSO:2.10±0.21,IR+SAHA:5.21±0.57,n=3,P<0.05),并提高CD68+CD86+KCs比例(LPS+Scramble:21.25±1.71%,LPS+SAHA:9.92±0.87%,n=3,P<0.05)。结论:SAHA可能通过抑制AKT/m TOR自噬通路活性,提高自噬水平的同时降低P65活化程度进而降低M1型KCs比例,从而减轻大鼠肝移植后IRI程度。