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缺血性脑卒中以其高发病率、死亡率、致残率严重危害人类健康，已成为当代人类三大疾病死亡原因之一。缺血性脑卒中是脑血管病危急重症之一，急性期起病急骤，此期救治对提高抢救成功率和病后生存质量具有重要意义。缺血性脑卒中后梗塞灶周围水肿压迫脑组织导致循环血流下降形成梗死灶周围缺血半暗带。凋亡是缺血半暗带神经细胞死亡的主要形式，抑制神经细胞凋亡可以减轻缺血半暗带的损伤，挽救濒死神经细胞，改善缺血性卒中预后。因此，如何减轻脑梗死后神经细胞凋亡的发生发展是脑血管病研究中的重点和难点所在。 中医认为中风病的基本病机为本虚标实，病位在脑。缺血性脑卒中发生的主要病因病机在于患者平素气血亏虚，心、肝、肾三脏阴阳失调，加之忧思恼怒，或外邪侵袭等诱因，导致气血运行受阻，肌肤筋脉失于濡养，或阴亏于下，阳盛于上，蒙蔽清窍，阴阳不相维系所致。吾师涂晋文教授强调缺血性脑卒中的根本病机为因虚致瘀，其病理环节是正气耗损，脑脉瘀滞，其病位在脑，病性为本虚标实。虚者，是气血、津液、精髓之不足；瘀者，乃血瘀、痰浊之类。因此，拟定了益气活血、化痰通络的中药复方白花前胡液，以神经细胞凋亡为切入点，通过在体和体外细胞培养实验，以整体器官功能，病理组织改变及细胞和分子生物等三个层次系统，研究复方白花前胡液的脑保护作用及其可能机制。复方白花前胡液抗大鼠脑缺血再灌注损伤的相关实验研究 第二部分复方白花前胡液对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡的影响 大鼠脑组织石蜡切片采用原位末端标记(T UNEL)法检测神经细胞凋亡。结果表明模型组TUNEL染色阳性颗粒显著增多，凋亡神经细胞从病灶中心到缺血半暗带区均有发生，尤以半暗带为多。脑缺血再灌注3日后，平均神经细胞凋亡率为38.5%;复方白花前胡液大、中、小剂量组3d凋亡率均有减少，分别为22.2%、24.1%、32.7%，与模型组比较差异均具有显著统计学意义(P<0.01或P<0.05)，提示复方白花前胡液能够有效抑制脑缺血再灌注模型大鼠神经细胞凋亡。第三部分复方白花前胡液对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡相关塞因 Be一2、Bax、easpase一3蛋白水平的影响 大鼠脑组织石蜡切片采用免疫组化染色法检测凋亡调控基因bc卜2，bax、caspase一3的蛋白水平。模型组Bcl一2蛋白阳性染色细胞数较假手术组显著增高(P<0.01)，复方白花前胡液大、中、小剂量组Bcl一2蛋白阳性细胞数较模型组明显升高(p<0.05或p<0.01)。模型组Bax、easpase一3蛋白阳性染色细胞数较假手术组明显增高(P<0.01)，复方白花前胡液大、中剂量组较模型组阳性细胞数降低(P<0.01或P<。.05)。提示复方白花前胡液抑制脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡的机制与调节Bcl一2、bax、caspase一3基因表达有关。第四部分复方白花前胡液对拟缺血诱导的神经细胞凋亡及其机制研究 培养的海马神经细胞，分为正常组、模型组、复方白花前胡液大、中剂量组、尼莫地平对照组，采用缺氧罐(通入95%N:和5%CO:的混合气体)和无糖Earle，s液进行缺氧/缺糖处理3h，再复氧复搪24h后，显微镜观察细胞形态，荧光染色法流式细胞仪检测细胞凋亡率，并分别检测乳酸脱氢酶含量及细胞游离钙的含量。倒置相差显微镜下，正常组细胞贴壁良好，分布均匀，结构清晰，胞体呈锥形或多极形，突触伸长，突触间联系密切;模型组细胞贴壁不良，肿胀变形，部分细胞胞浆内出现大小空泡。治疗组与模型组细胞病理结构变化较模型组有显著减轻。 模型组LDH释放率较正常组有明显增高(P<0.05)，各复方白花前胡液组在不同时点LDH释放率与模型组相比有显著降低(P<0.05)，提示复方白花前胡液能使神经细胞具有抗缺氧/缺糖损伤作用。 流式细胞仪检测结果显示，正常培养的海马神经细胞凋亡率为9.2%，缺氧/缺糖培养3h和复氧复糖24h，模型组细胞凋亡率为42.7%，复方白花前胡液中、高浓度实验组细胞凋亡率分别下降至21.4%、23.6%，与模型组相比有显著差异(P<0.01)。提示缺氧缺糖培养可以诱导海马神经细胞凋亡，复方白花前胡液对缺氧/缺糖培养诱导的神经细胞凋亡有一定程度的抑制作用。 应用荧光分光光度剂检测神经细胞内caZ‘浓度。结果与正常组比较模型组缺氧/缺糖培养3h复氧复糖24h胞内caZ‘浓度均显著增高(P<0.01)，复方白花前胡液抗大鼠脑缺血再灌注损伤的相关实验研究复方白花前胡液实验组与模型组比较缺氧/缺糖培养3h复氧复糖24h胞内caZ‘浓度显著下降(P<0.05)。提示复方白花前胡液对神经细胞内caZ’浓度升高具有明显抑制作用，其抑制细胞凋亡的作用机理可能与抑制细胞内钙离子的升高有关。 缺血性脑卒中后由于梗死区血流急剧下降，中心区大量神经细胞坏死难于挽救，因此对缺血半暗带区的救治是治疗的根本，受损者或可得到保护而免于坏死，逐渐恢复其功能。本研究表明复方白花前胡液能够抑制脑缺血再灌注损伤所致的神经细胞凋亡，具有脑保护作用。为复方白花前胡液未来的临床应用提供了实验依据。