第一部分西南地区假肥大型肌营养不良的诊治现状及生存质量分析目的：分析西南地区假肥大型肌营养不良（Duchenne/Beckermuscular dystrophy, DMD/BMD）患儿的诊治现状及生存质量（qualityof life, QoL）状况，以提高其诊疗水平。方法：选取2009年12月～2011年12月我院疑诊DMD/BMD病例294例，采用多重聚合酶链反应（multiplepolymerase chain reaction, mPCR）+短串联重复序列（short tandemrepeat, STR）多态性连锁分析法行dystrophin基因检测。随机抽取17例基因检测阴性患儿行腓肠肌活检，光镜下观察病理改变。遵循量表引进程序，首次将儿童生存质量量表PedsQLTM3.0神经肌肉疾病模块（pediatric quality of life inventoryTM3.0neuromuscular module,PedsQLTM3.0NMM）翻译、修订并形成PedsQLTM3.0NMM中文版后，随机抽取39例确诊DMD/BMD患儿及其家长，调查其QoL。并随访治疗情况。结果：294例疑诊病例mPCR+STR法检出外显子/STR缺失的阳性率为32.65%。外显子48、50和STR49CA、50CA缺失率最高。17例活检的阳性率为82.35%。PedsQLTM3.0NMM中文版的缺失率<1%，克伦巴赫系数α（Cronbach’s α）>0.7，评定者间的信度（intraclasscorrelation coefficient, ICC）>0.6，各条目与所属维度的Spearman相关系数（correlation coefficient of Spearman, rs）呈中、高度相关，相对拟合指数（Comparative fit index, CFI）>0.9。DMD/BMD患儿病情越重，疾病维度评分越低，差异有显著性（P <0.05）；而交流、家庭维度评分普遍较低，差异无统计学意义（P>0.05）。101例确诊的DMD患儿中，17.82%予口服泼尼松0.75mg/kg/d治疗，大部分未予治疗，观察随访中。结论：mPCR+STR法可提高dystrophin基因检测的准确性，但阳性率不高；肌肉活检是确诊手段的良好补充。PedsQLTM3.0NMM中文版具有较好的信度和效度，可应用于我国DMD/BMD患儿QoL的评价。病情轻重是影响DMD/BMD患儿QoL的主要因素；他们普遍缺乏良好的交流，家庭经济条件较差。大部分DMD患儿未予治疗。制定适合我国国情的DMD/BMD临床诊治指南尤为迫切。第二部分糖皮质激素治疗Duchenne型肌营养不良的临床疗效观察目的：参考国外Duchenne型肌营养不良（Duchenne musculardystrophy, DMD）的临床诊治指南，多学科协作，进行糖皮质激素（glucocorticoid，GC）治疗DMD的前瞻性、随机、对照的临床试验，系统地评估GC治疗DMD的疗效和远期预后的影响，以期为西南地区DMD的早期诊断、早期干预、疗效评价及副反应监测提供建设性的指导意见。方法：选取2010年12月～2012年12月我院经基因或病理检测确诊为DMD患儿66例，按随机数字表法随机抽取进入泼尼松组（36例）和对照组（30例）。为期6～12月泼尼松0.75mg/kg/d治疗的前瞻性临床试验后，比较治疗前后DMD患儿的肌力、肌肉功能、肌酸激酶（creatine kinase, CK）值、骨骼肌B超、生存质量（qualityof life, QoL）的变化，并监测药物副反应。结果：治疗6～12月后，泼尼松组患儿的肌力、肌肉功能基本保持稳定并有好转，与治疗前比较，差异无显著性（P>0.05）。骨骼肌B超回声减弱，皮下脂肪厚度降低；QoL明显改善，与治疗前及同时点对照组比较，差异有显著性（P <0.05）。治疗6月后，泼尼松组患儿的CK值明显增高，与治疗前及同时点对照组比较，差异有显著性（P <0.05）；此后CK值逐渐下降，但尚未恢复正常范围。对照组患儿随病情的进展，肌力、肌肉功能下降明显，骨骼肌B超回声及QoL有明显恶化趋势，CK值有逐渐下降趋势，与治疗前比较，差异有显著性（P <0.05）。临床试验过程中，大部分DMD患儿无明显副反应，治疗前后，两组DMD患儿的体重、身高、血压（舒张压）相比较，差异均无显著性（P>0.05）。结论：泼尼松0.75mg/kg/d适合西南地区DMD患儿的中长期治疗，副反应少。DMD患儿血清CK值的变化具有诊断价值，但存在个体差异，且受多种因素的影响，无法作为评估药物疗效的客观指标。骨骼肌B超不但能判断肌肉病变部位、范围、程度，为疾病的早期诊断、鉴别诊断及病情随访提供客观依据；而且动态监测骨骼肌B超的变化可作为评估DMD药物疗效的客观指标。这些结果可初步为西南地区DMD的早期诊断、早期干预、疗效评价及副反应监测提供建设性的指导意见。第三部分肌肉特异性microRNAs在Duchenne型肌营养不良中的表达及意义目的：通过检测Duchenne型肌营养不良（Duchenne musculardystrophy, DMD）血清肌肉特异性microRNAs（miRNAs）的表达水平，探讨其与DMD病情严重程度的相关性，以期作为DMD诊断的新型生物标志物。方法：2010年12月～2012年12月我院经基因或病理检测确诊的DMD患儿66例，按随机数字表法随机抽取进入实验组（39例）。于同一时期本院儿童保健科健康体检的健康男性儿童中抽取对照组36例。行肌力、肌肉功能、生存质量（quality of life, QoL）评估及血清肌酸激酶（creatine kinase, CK）检测后，采用实时定量荧光聚合酶链反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）法检测血清肌肉特异性miRNAs的表达水平，并与血清CK值及肌力、肌肉功能和QoL进行比较，探讨肌肉特异性miRNAs与DMD病情严重程度的相关性。结果：实验组血清肌肉特异性miRNAs的表达水平较对照组明显增高，差异有显著性（P <0.01）。肌肉特异性miRNAs与年龄之间无相关性（P>0.05），与肌力、肌肉功能及QoL之间存在显著的负相关性（P <0.05），尤以miRNA-206为显著。CK值与年龄之间存在显著的相关性（P <0.05），与肌力、肌肉功能及QoL无相关性（P>0.05）。受试者工作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲线分析显示，肌肉特异性miRNAs的AUC≥0.9，诊断价值较高，灵敏度和特异度好，尤以miRNA-206为著。结论：肌肉特异性miRNAs在DMD患儿的血清中高度表达，稳定性强，并与病情的严重程度密切相关，可作为DMD诊断的新型生物标志物，对指导相关基础与临床研究具有重要的意义。