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本研究采用双层平板与滤纸平板相结合,从土壤中筛选到能强烈分解纤维素的好氧性黄色菌株,结合形态学特性、生理生化特征初步鉴定该菌为生孢噬纤维菌,命名为生孢噬纤维细菌JL-02(SporocytoPhagaJL-02)菌株。 JL-02(SporocytoPhagaJL-02)菌株能降解纤维素合成胞外多糖,培养七天有81.5%的纤维素滤纸被降解,但只测得极低的纤维素酶活,该菌可能存在特殊的纤维素降解机制。采用发酵法制备胞外多糖,并用乙醇沉淀的方法得到胞外多糖粗品,1ml样品液中多糖含量为0.172 mg;Clayton培养基是制备胞外多糖的较好的培养基;经草鱼急性毒性实验确定JL-02菌株及其胞外粗品多糖对草鱼毒性较低或无毒,当腹腔注射浓度为3.2mg/ml时,致死率为10%,等于或低于1.6mg/ml时对草鱼无毒性。 按每kg饲料加0、50mg、100mg、150mg多糖粗品饲喂草鱼证实有免疫促进作用:50mg组受免草鱼的NBT阳性细胞数量分别为43.80±1.90、44.9±2.54、43.90±1.87;100mg剂量的分别为85.47±3.48、88.8±3.21、87.80±3.94;150mg剂量的为79.83±3.6、85.6±2.20、84.43±2.67。所有试验组数据极显著高于空白对照组(P<0.01),其中100mg组NBT阳性细胞数量最高;剂量为50mg时,受免草鱼的溶菌酶活力分别为0.108±0.007、0.13±0.01、0.122±0.009;100mg剂量的分别为0.176±0.019、0.193±0.01、0.189±0.0068;150mg剂量的为0.166±0.062、0.182±0.008、0.176±0.006;所有试验组的溶菌酶活力均高于空白对照组(P<0.05);所有试验组抗菌活力值较对照组就有不同程度的提高,一直持续到第36天。其中150mg组上升最快,24天时血清抗菌活力达到峰值;各实验组的白细胞的吞噬百分比和吞噬指数都比对照组高,其中以100mg组的白细胞的吞噬百分比和吞噬指数最高;实验组鱼体增重和相对生长速率都极显著高于空白对照组(P<0.01);随着多糖用量增加,实验鱼增重量和相对生长速率出现递增,用量为100mg时,鱼体的增重和相对生长速率达最大值,用量为150mg/kg时,抑制鱼生长;经嗜水气单胞菌攻毒后,对照组死亡率达到53.3%,试验组死亡率较低,免疫保护率依次达到25%,50%,37.5%。 对草鱼的非特异性免疫、相对生长速率、成活率的影响结果综合分析,生孢噬纤维细菌胞外多糖可被用作水产动物免疫增强剂,其在草鱼饲料中最佳添加量