零余子多糖的分离鉴定及生物活性研究

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零余子为山药所结之子,俗称“山药蛋”,主要含淀粉、多糖(包括黏液质及糖蛋白)、蛋白质以及多种游离氨基酸、尿囊素、胆碱等成分。目前,零余子除少量用于食用、药用和做种外,大部分都被废弃,浪费了资源。近年来,多糖由于具有来源广以及抗氧化、降血脂、降血糖、抗菌等多种活性功能的特点,成为研究热点之一。已有研究表明,零余子多糖具有较好的抗氧化与降血糖作用,为给零余子的开发利用提供实验依据,本文围绕零余子多糖的分离鉴定及生物活性,主要展开了以下工作:1.在单因素试验的基础上,采用响应面法优化了零余子多糖的超声波辅助提取工艺,得出最佳提取工艺参数为液料比17.8:1(mL/g)、超声功率760.4 W、提取时间22.9 min,粗多糖得率达61.94%(零余子粉质量为3 g);提取液经脱蛋白、DEAE-52与SephadexG-100柱层析纯化后,主要得到水洗脱(PB-1)、0.1 mol/LNaCl洗脱(PB-2)两种多糖组分。2.对所得两种多糖组分进行了纯度与结构的鉴定,紫外光谱分析表明,两种多糖均不含蛋白质与核酸;经SephadexG-100柱层析洗脱,苯酚-硫酸法跟踪检测多糖含量,结果表明皆为均一多糖;以高效液相色谱法分析了单糖组成,结果表明PB-1主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖和半乳糖组成,相对摩尔比为2.19:1.56:1.78:0.78,PB-2主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖和木糖组成,相对摩尔比为4.24:3.73:9.63:13.36;电镜扫描显示,PB-1为杆状、疏松多孔,PB-2排列紧密、呈螺旋形。3.对两种多糖进行抗氧化性研究,结果显示PB-1、PB-2对DPPH·、O2-·与·OH均有不同程度的清除作用,并在所研究质量浓度范围内随着浓度的上升而增强,其中PB-1对DPPH·、O2-.的清除效果以及还原力均优于PB-2,但二者对·OH的清除能力较为接近。4.以小鼠负重力竭游泳时间及生化指标评价了 PB-1的抗疲劳活性,结果表明低、中、高三剂量组显著延长力竭游泳时间,明显降低机体尿素氮、乳酸和丙二醛水平,低、高两个剂量组可显著增加肝糖原储量,说明零余子多糖具有较好的抗疲劳活性。
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