【摘 要】
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真核生物20s蛋白酶体是由四叠环组成的,7个α亚基组成的两个外环,七个p亚基组成两个内环,最终形成对称的桶装结构（α1-7β1-7β1-7α1-7）。 REGγ（PA28γ, PSME3）是蛋白酶体激活因子11s家族的一员,可以结合并激活20s蛋白酶体。迄今为止,只发现了几种REGγ靶蛋白,如SRC-3,p21,Smurfl, Smurf2, REGγ以非依赖ATP和泛素的方式降解这些蛋白,但是R
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真核生物20s蛋白酶体是由四叠环组成的,7个α亚基组成的两个外环,七个p亚基组成两个内环,最终形成对称的桶装结构（α1-7β1-7β1-7α1-7）。 REGγ（PA28γ, PSME3）是蛋白酶体激活因子11s家族的一员,可以结合并激活20s蛋白酶体。迄今为止,只发现了几种REGγ靶蛋白,如SRC-3,p21,Smurfl, Smurf2, REGγ以非依赖ATP和泛素的方式降解这些蛋白,但是REGγ降解蛋白的机制还不清楚,REGγ其他的一些靶蛋白有待发现。在本研究中,我们从牛血红细胞中采用多步骤层析法纯化出20s,用一步亲和层析法纯化出REGγ,然后用纯化的20s和REGγ在体外降解疑似REGγ靶蛋白。REGγ在体外不能促进PKACα的直接降解,但在细胞内REGγ可以结合并调控PKACα的蛋白水平。我们也发现GST-REGγ和体外翻译α2,α6两个亚基有相互作用,而不和其他亚基相互作用,GST-REGγ的突变体N151Y也有相同趋势,但所有体外纯化的重组蛋白GST-α亚基都不和体外翻译的REGγ有相互作用,这暗示我们这种相互作用需要α亚基的某种修饰。总之,我们的研究为新的REGγ靶蛋白的发现和REGγ降解机制的研究提供了基础。
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