【摘 要】
：
目的1、探究长非编码RNA,CRNDE在骨肉瘤发生发展中的生物学作用及相关机制。2、探究卡博替尼对CRNDE促骨肉瘤细胞增殖和迁移的抑制作用。3、探究骨肉瘤组织中MIP4的表达及其与肺转移的相关性。方法1、通过原位杂交和QRT-PCR方法检测45例骨肉瘤组织和与其配对的非肿瘤组织中CRNDE的表达水平。并结合临床资料,分析这45例骨肉瘤患者临床病理特征和预后之间的相关性。2、构建CRNDE过表达和
【基金项目】
：
上海市浦江人才计划（17PJ1407600）；
论文部分内容阅读
目的1、探究长非编码RNA,CRNDE在骨肉瘤发生发展中的生物学作用及相关机制。2、探究卡博替尼对CRNDE促骨肉瘤细胞增殖和迁移的抑制作用。3、探究骨肉瘤组织中MIP4的表达及其与肺转移的相关性。方法1、通过原位杂交和QRT-PCR方法检测45例骨肉瘤组织和与其配对的非肿瘤组织中CRNDE的表达水平。并结合临床资料,分析这45例骨肉瘤患者临床病理特征和预后之间的相关性。2、构建CRNDE过表达和干扰慢病毒载体,转染入MG63细胞,筛选出转染效果最好的载体并构建稳转株。3、通过Star Base数据库分析出CRNDE与mi R-136-5p之间可能存在竞争性抑制,将CRNDE与mi R-136-5p结合的位点序列克隆并插入psi CHECK2载体,双荧光素酶实验验证CRNED为mi R-136-5p的ce RNA调控因子,Target Scan数据库预测mi R-136-5p靶向调控的基因可能为MRP9,构建荧光素酶报告载体,通过双荧光素酶实验证实MRP9是mi R-136-5p的下游靶基因。构建mi R-136过表达质粒并转入CRNDE过表达稳转株中,QRT-PCR及Western blot实验检测MRP9的表达水平,证实CRNDE通过抑制mi R-136-5p而间接上调MRP9的表达。4、CCK8实验、细胞划痕侵袭实验从体外验证CRNDE通过mi R-136-5p/MRP9轴来调控骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。5、构建骨肉瘤裸鼠模型,体内验证CRNDE对骨肉瘤细胞增殖的影响。用免疫组织化学染色法、QRT-PCR方法检测裸鼠肿瘤组织中MRP9的表达情况。6、用卡博替尼处理MG63细胞,通过CCK8实验、划痕侵袭实验检测卡博替尼对CRNDE促骨肉瘤细胞增殖迁移能力的抑制情况。7、用免疫组织化学染色的方法检测75例原发组织及其中配对的31例肺转移组织中MIP4的表达。分析原发灶MIP4的表达与肺转移的相关性。结果1、CRNDE在骨肉瘤组织中的表达水平明显高于正常组织。CRNDE高表达患者三年总生存率低于CRNDE低表达患者（74.1%vs 33.3%）,骨肉瘤患者肿瘤组织中CRNDE的表达水平与患者的临床分期和发生肺转移均有显著相关性（P<0.05）,而与肿瘤大小、病理类型、坏死率、局部复发情况无显著相关性（P>0.05）。2、荧光素酶实验、QRT-PCR、Western blot验证了CRNDE作为ce RNA与mi R-136-5p结合,靶向调控MRP9的表达。3、CRNDE可促进骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。过表达mi R-136-5p可抑制CRNDE的促增殖、迁移和侵袭的能力。4、骨肉瘤裸鼠模型进一步证实了CRNDE可促进骨肉瘤细胞的增殖。5、卡博替尼可以一定程度上抑制CRNDE促进骨肉瘤细胞增殖和迁移的能力。6、MIP4在骨肉瘤患者原发组织中的表达量与肺转移组织中的表达量具有明确相关性（r=0.527,p<0.05）。骨肉瘤原发组织中MIP4的表达与临床分期、远处转移相关（p<0.05）,与性别、年龄、病理类型、肿瘤大小和肿瘤坏死率无明显相关性（p>0.05）。MIP4的表达量是骨肉瘤肺转移预后的独立危险因素（OR值为1.307,P<0.05）。MIP4高表达患者的三年总体生存率低于低表达患者。（P<0.05）结论1、CRNDE的表达与骨肉瘤患者的临床分期、肺转移具有相关性,可作为不良预后的标志。2、CRNDE通过调控mi R-136-5p/MRP9轴来促进骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。3、卡博替尼可以抑制CRNDE促骨肉瘤细胞增殖和迁移的能力。4、MIP4与骨肉瘤的肺转移和进展相关,极有可能是判断骨肉瘤肺转移及预后的重要指标。
其他文献
目的:通过测定非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清中血小板反应蛋白2（THBS2）的表达水平,分析THBS2的表达水平与NSCLC患者临床病理特征之间的相关性,并绘制受试者工作特征曲线（ROC）,评价THBS2在NSCLC患者病情评估及辅助诊断性方面的临床意义。方法:随机选取我院呼吸内科及胸外科在2019年3月-2019年9月期间收治的69例NSCLC患者及50例健康体检者作为研究对象,采用酶联免疫
目的:多项研究表明在恶性肿瘤患者中,血清白介素浓度与肿瘤的进展和预后不良存在强烈的正相关关系。本研究通过对甲状腺良恶性肿瘤患者血清IL-6、IL-8水平的差异分析,结合甲状腺恶性肿瘤患者病理特征,进一步探讨并阐明两者间的相关性,以明确血清IL-6、IL-8能否为甲状腺癌患者诊断及侵袭性的预测提供参考。方法:收集2018年11月至2019年2月于上海交通大学医学院附属新华医院普外科甲乳病区行甲状腺外
目的:评价艾拉光动力疗法（ALA-PDT,5-aminolaevulinic acid-photodynamic therapy）治疗宫颈低级别鳞状上皮内病变（LSIL,Low-grade Squamous Intraepithelial Lesion）的临床疗效。方法:将2017年3月-2019年7月在上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科宫颈门诊就诊的年龄为21-70岁的阴道镜活检病理为宫颈低级
近几年近红外荧光成像技术迅猛发展,使得其在胃肠外科手术中发挥出重要作用,尤其是术中前哨淋巴结的探查。吲哚箐绿是一种新型示踪剂,术中可近红外荧光成像。使用吲哚箐绿做荧光剂,可以无创探测淋巴脉管系统,从而进行术中实时的淋巴脉管探测。本研究主要探讨近红外荧光成像在食管癌微创根治术中探测前哨淋巴结的可行性以及探索食管鳞癌中淋巴引流特征。在2018年11月至2019年3月,该研究共纳入上海市胸科医院21例临
背景和目的:IL-27是一种抗炎细胞因子,具有一定的抗肿瘤效应。但是,以IL-27为基础的肿瘤免疫疗法尚未应用至临床实验中。本课题旨在探索IL-27重组腺相关病毒（AAV-IL-27）瘤内注射的抗肿瘤效应,并进一步探究其作用机制。研究方法:（1）应用q PCR、ELISA和流式细胞术评估AAV-IL-27在体内和体外对肿瘤细胞的感染效应。（2）利用荷瘤小鼠,评估瘤内注射AAV-IL-27在体内的抗
研究目的:机器人辅助胸腔镜（RATS）相比于传统电视胸腔镜（VATS）有诸多优势,既往多用于早期肺癌的治疗,随着技术的进步越来越多的用于局部晚期肺癌的治疗。本研究拟回顾性分析我中心1000例机器人肺部手术临床结果,并在局部晚期肺癌的治疗中与传统胸腔镜手术及开放手术做对比。研究方法收集上海市胸科医院肿瘤外科连续1000例行机器人辅助胸腔镜肺部手术患者的临床资料,总结相关经验,将cIIB-IIIA期非
肝细胞癌是我国恶性肿瘤中排名第二位的死因,且全球近半数的肝细胞癌均发生在中国。一方面,该疾病的发病机制复杂,风险因素多样。另一方面,即使目前的医疗水平有了极大发展,肝细胞癌的5年生存率仍然较低。建立准确的肝细胞癌的预测模型是针对不同风险分型的患者实施相应的治疗,提高预后生存时间的关键。但是仅基于传统的临床指标来预测肝细胞癌患者预后尚不尽如人意,因此引入分子水平信息对患者进行更加精准的风险分类是十分
以3-巯丙基-1,1,1,3,5,5,5-七甲基三硅氧烷与1-烯烃基-3-甲基咪唑溴盐为原料，通过巯基-烯烃点击反应高效合成含有不同联接基团（—CH2—）的咪唑盐阳离子三硅氧烷表面活性剂（[Si3-Cn-Min]Br）。通过表面张力探索—CH2—链节数量对其表面活性的影响。发现其最低表面张力为27～29 mN/m,最低表面张力和饱和吸附量随着—CH2—数量的增加而增大，而临界胶束浓度和单分子在界面
目的:本研究旨在解析乳头状甲状腺微癌（papillary thyroid microcarcinoma,PTMC）侵袭性的遗传学特征与危险因素,并初步探讨PTMC并侧区淋巴结转移的相关手术策略。方法:1.16例PTMC根据是否伴有腺外侵犯和淋巴结转移分为侵袭组与非侵袭组,并行全外显子测序。GO/KEGG分析与侵袭性相关的基因突变及其生物学功能,另外70例样本的验证队列行靶向测序,验证筛选出的基因突
目的:甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤,分化型甲状腺癌占其中的90%以上。BRAF基因突变是分化型甲状腺癌最常见的基因突变,其与肿瘤的发生、发展有关。虽然携带BRAF基因突变的患者预后通常差于BRAF基因野生型患者,但突变患者的预后也不一致。因此,研究BRAF基因突变的作用机制并为这类患者寻找新的预后标记物来加强风险评估会有利于提高对BRAF基因突变分化型甲状腺癌的预后判断和诊治水平。方法:从