【摘 要】
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目的:研究活化的蛋白激酶C1受体(RACK1)在脑缺血再灌注(I/R)损伤中的作用及其潜在的分子机制。方法:在体内建造成年雄性SD大鼠(250-280g)的大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型,在体外通过使培养的原代神经元暴露于氧气葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)的方法,分别模拟体内外I/R损伤,并且通过大鼠侧脑室内注射过表达质粒,在体内产生T50点突变(T50A)的RACK1过表达和野生型R
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目的:研究活化的蛋白激酶C1受体(RACK1)在脑缺血再灌注(I/R)损伤中的作用及其潜在的分子机制。方法:在体内建造成年雄性SD大鼠(250-280g)的大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型,在体外通过使培养的原代神经元暴露于氧气葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)的方法,分别模拟体内外I/R损伤,并且通过大鼠侧脑室内注射过表达质粒,在体内产生T50点突变(T50A)的RACK1过表达和野生型RACK1过表达,在体外通过神经元培养基内过表达质粒的转染,分别引起神经元内T50点突变RACK1过表达和野生型RACK1过表达。结果:在体内实验中大鼠MCAO 1.5h后半暗带神经元中RACK1蛋白水平降低,但其在苏氨酸/丝氨酸残基处的磷酸化水平显著升高,外源性质粒转染后,野生型RACK1过表达可减轻脑梗塞面积,脑水肿,神经元死亡,神经元组织缺失和神经行为功能障碍,而RACK1(T50A)过表达会加重I/R损伤。在体外实验中神经元在OGD/R后RACK1蛋白T50处的磷酸化会导致其从胞质核糖体转移到轴突,功能上从Beclin-1翻译抑制转换为自噬诱导。结论:在脑缺血再灌注损伤中RACK1蛋白T50处发生磷酸化,使其功能从Beclin-1翻译抑制转换成自噬诱导,提高早期缺血神经元的自噬水平,从而发挥神经保护作用。
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