【摘 要】
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酵母不仅是一种常见的重要工业微生物，同时也是研究真核微生物的一种较为理想的模式生物。目前针对酵母的蛋白质组学研究主要集中在胞内蛋白上，对于胞外蛋白的研究非常少见。然而，最近的研究表明胞外蛋白在微生物生长过程中有着十分重要的作用。本文以酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）为研究对象，首先分别建立酿酒酵母FFC2146胞内蛋白和胞外蛋白的双向电泳图谱。在建立酿酒酵母FFC214
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酵母不仅是一种常见的重要工业微生物，同时也是研究真核微生物的一种较为理想的模式生物。目前针对酵母的蛋白质组学研究主要集中在胞内蛋白上，对于胞外蛋白的研究非常少见。然而，最近的研究表明胞外蛋白在微生物生长过程中有着十分重要的作用。本文以酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）为研究对象，首先分别建立酿酒酵母FFC2146胞内蛋白和胞外蛋白的双向电泳图谱。在建立酿酒酵母FFC2146胞外蛋白图谱的过程中为了减少外来蛋白所带来的干扰，本文创新性的使用了YNB培养基，并且使用了离心——超滤——冻干的方法迅速提取酿酒酵母FFC2146胞外蛋白以减少FFC2146酿酒酵母胞外蛋白提取的时间和提高提取蛋白的纯度及效率；使用SDS缓冲液悬浮酿酒酵母FFC2146细胞——煮沸——超声——增溶得到FFC2146酿酒酵母胞内蛋白样品。经过双向电泳分离，硝酸银染色和PDQuest图像分析可以检测到200多种酿酒酵母FFC2146胞外蛋白和500多种酿酒酵母FFC2146胞内蛋白。本文在研究酿酒酵母胞外蛋白功能的过程中利用离心—超滤—冻干法排除碳源、氮源、有机酸、脂类、空间、毒素等因素干扰直接研究酿酒酵母FFC2146培养20小时的胞外蛋白对酿酒酵母FFC2144和酿酒酵母FFC2146的生长以及有机酸积累的影响。实验方法是将提取出来的酿酒酵母FFC2146胞外蛋白分别加入酿酒酵母FFC2144和酿酒酵母FFC2146的培养基中，与各自的空白组作对照，比较两种培养条件下酿酒酵母的生长情况、有机酸积累情况以及酿酒酵母胞内蛋白种类和数量的变化情况。实验结果表明酿酒酵母FFC2146培养20小时的胞外蛋白对酿酒酵母2144和酿酒酵母FFC2146的生长和有机酸积累有着明显的影响，而这种影响是通过改变酵母细胞内蛋白质的种类和数量来实现的。
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