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现代生活方式导致目前肥胖人群的数量急剧升高。研究显示,普洱茶具有一定的减肥降脂作用,然而关于其减肥降脂的作用机制尚未彻底阐明。因此,本课题通过普洱茶茶色素对SD(Sprague dawley)大鼠和HepG2细胞的脂质代谢的影响研究其肥降脂作用及其机理。本文从以下三部分进行研究:1、普洱茶茶色素对脂质代谢的影响(1)采用不同浓度普洱茶茶色素对高脂饲料喂养的正常SD大鼠连续干预12周,观察普洱茶茶色素对大鼠肝脏中甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量。结果表明:普洱茶茶色素降低了高脂大鼠肝脏中TG和TC含量,且呈剂量依赖性。特别是高浓度处理组可使高脂状态下大鼠肝脏中TG由0.345 mmol/g到0.160 mmol/g,TC由0.186 mmol/g到0.110 mmol/g,与正常对照组的结果相近,从而有效的改善大鼠肝脏中脂质代谢紊乱。(2)利用MTT法确定普洱茶茶色素作用HepG2细胞的浓度范围,并通过油酸富集培养构建细胞肥胖模型。将HepG2细胞分为正常培养和油酸诱导培养组,分别予以普洱茶茶色素进行干预,从细胞水平研究普洱茶茶色素对脂代谢的影响。结果显示:普洱茶茶色素能显著降低油酸诱导状态下HepG2细胞内TG含量,随普洱茶茶色素浓度增加而减少,在实验浓度范围内最高能降低50.30%。此外,可降低正常培养下HepG2细胞内TG和TC含量和油酸诱导下HepG2细胞内TC含量,作用效果呈剂量依赖性但结果不显著。同时,油红O染色结果显示普洱茶茶色素作用后,油酸诱导的HepG2细胞内脂滴明显减少。说明普洱茶茶色素能维持肝细胞正常形态,有效降低脂质在肝细胞中的沉积。2、普洱茶茶色素对HepG2细胞的氧化应激影响将HepG2细胞分为正常培养和油酸诱导培养组,分别予以普洱茶茶色素进行干预,检测普洱茶茶色素对HepG2细胞的丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及过氧化氢酶(CAT)活力的影响。结果表明:普洱茶茶色素能有效降低油酸诱导培养的HepG2细胞的细胞外排GSH含量,CAT活力,提高细胞内MDA含量,但对正常培养的HepG2细胞的作用效果不明显。与油酸组相比,400μg/mL普洱茶茶色素作用油酸环境下的HepG2细胞外排CAT活力和GSH含量分别提高763.23%和134.09%,同时细胞内MDA含量降低49.59%。说明普洱茶茶色素对油酸诱导的HepG2细胞有良好的抗氧化作用。3、普洱茶茶色素对脂质代谢作用的机理研究(1)利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术测定脂肪酸合成酶(FAS)、固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、三磷酸腺苷结合转运子A1(ABCA1)、胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)、羟基甲戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA reductase,HMGCR)的mRNA转录水平。结果表明:普洱茶茶色素作用12周后大鼠肝脏中FAS、SREBP-1c、HMGCR的mRNA表达水平显著下调。普洱茶茶色素作用HepG2细胞24 h后能显著下调油酸诱导下HepG2细胞的FAS和SREBP-1c的mRNA表达水平,显著上调ABCA1的转录水平,CYP7A1的转录水平呈上升趋势。(2)用Western blot法检测测大鼠肝脏和HepG2细胞中p-AMPK蛋白的表达水平,结果表明:普洱茶茶色素能激活大鼠肝脏和HepG2细胞中AMPK蛋白的磷酸化水平,显著上调p-AMPK蛋白在大鼠肝脏和油酸状态下HepG2细胞中的表达量。综上,普洱茶茶色素可通过改善机体和细胞中脂质代谢紊乱,提高抗氧化水平,上调或下调脂质代谢相关的酶和转录因子的水平来达到干预脂质代谢,预防和治疗肥胖的作用。