【摘 要】
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目的:根据临床中骨肉瘤的高复发和易转移特征,从普通人骨肉瘤HOS细胞株中探索干细胞的分离及鉴定方法,并检测其生物学特性,为进一步研究治愈及靶向治疗骨肉瘤打下理论基础。
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目的:根据临床中骨肉瘤的高复发和易转移特征,从普通人骨肉瘤HOS细胞株中探索干细胞的分离及鉴定方法,并检测其生物学特性,为进一步研究治愈及靶向治疗骨肉瘤打下理论基础。方法:从中国科学院(上海细胞库)购买人骨肉瘤HOS细胞株,大量培养扩增,通过有限稀释法对人骨肉瘤HOS细胞进行干细胞的分选,对获取的细胞分别用实时荧光定量PCR和Western blot法检测Nanog,SOX-2,OCT4 m RNA的表达及蛋白的表达。同时检测干细胞的自我更新能力、增殖及侵袭迁移能力。结果:骨肉瘤HOS细胞株传代并大量增殖。通过有限稀释法单克隆出的HOS-M细胞具有较强的增殖和迁移能力,HOS-M细胞表面Nanog,SOX-2,OCT4 m RNA和蛋白的表达水平均明显高于母系HOS细胞。细胞增殖实验和划痕实验结果发现HOS-M细胞具有较强的增殖和侵袭迁移能力。结论:有限稀释法可用于骨肉瘤HOS细胞的分选,本实验所得的骨肉瘤细胞具有干细胞特性。
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