研究背景高尿酸血症(Hyperuricemia,HUA)目前已被证实与高血压、动脉粥样硬化和冠心病等多种心血管疾病密切相关。血管内皮是预防心血管疾病的第一道防线。内皮细胞(Endothelial Cells,ECs)能合成和分泌多种活性物质,保证血管正常的收缩和舒张功能,维持血管张力。正常的血管内皮细胞对心血管系统有重要的保护作用。现有的研究表明,高尿酸可以通过多种机制造成血管内皮损伤。因此,减少高尿酸造成的血管内皮损伤,改善内皮功能,对高尿酸相关血管病变的防治具有重要意义。C1/q 肿瘤坏死因子相关蛋白 3(Clq/Tumor Necrosis Factor-Related Protein 3,CTRP3)是一种新型脂肪因子,是脂联素家族成员之一。近年有研究发现,CTRP3不仅能提高胰岛素敏感性,调节糖脂代谢,还能抑制心肌纤维化,促进血管生成,对心血管疾病具有潜在保护作用。然而,CTRP3是否能保护高尿酸诱导的血管内皮损伤,目前尚未见相关报道。研究目的本研究旨在明确CTRP3是否保护高尿酸损伤的血管内皮细胞,该作用是否通过下调TLR4信号通路和减少黄嘌呤氧化酶活性从而改善高尿酸诱导的炎症反应和氧化应激而实现。方法体内实验:雄性SD大鼠饮用10%果糖水12周构建高尿酸血症动物模型,然后予以Ad-CTRP3或Ad-GFP单次尾静脉注射。2周后检测大鼠血尿酸、羟自由基清除活性、MDA、NO、TNF-α、IL-6及胸主动脉尿酸、ROS、MDA浓度和XO活性;HE及TUNEL法观察胸主动脉形态学及内皮细胞凋亡情况,qRT-PCR检测胸主动脉eNOS、TNF-α和IL-6的mRNA表达水平,western blot检测胸主动脉的CTRP3和TLR4的蛋白表达。体外实验:人脐静脉内皮细胞首先予以Ad-CTRP3或Ad-GFP转染,然后以595μmol/L尿酸刺激48h,部分细胞予以1μMTAK242(TLR4特异性抑制剂)预处理1h。检测细胞培养液上清NO水平,检测细胞MDA浓度和XO活性;流式细胞术检测细胞内ROS水平,TUNEL法观察细胞凋亡情况,qRT-PCR检测细胞的 eNOS、TNF-α、IL-6 的 mRNA 水平,western blot 检测细胞的 CTRP3 和TLR4的蛋白表达。结果高尿酸大鼠的血管内皮功能受损,炎症反应及氧化应激增强,同时胸主动脉组织的CTPR3蛋白表达降低,TLR4蛋白表达升高,黄嘌呤氧化酶活性升高。CTRP3过表达后,高尿酸大鼠的TLR4蛋白水平和黄嘌呤氧化酶活性降低,炎症因子水平减少,氧化应激反应降低,高尿酸大鼠的主动脉内皮形态和功能得到改善。同样,CTRP3过表达可减弱TLR4介导的炎症反应,抑制黄嘌呤氧化酶相关的氧化应激,进一步减轻尿酸对人脐静脉内皮细胞的内皮损伤。结论CTRP3通过减轻高尿酸诱导的炎症反应和氧化应激保护血管内皮功能。该作用可能通过抑制TLR4介导的炎症反应和减少黄嘌呤氧化酶活性而实现。