肝复康对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1及Collagen Ⅲ表达的影响

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目的:在正常肝脏的纤维组织中存在着细胞外基质(ECM)生成与降解的动态平衡,肝纤维化是ECM生成与降解过程失衡的结果[1,2]。既往对ECM的生成与沉积研究较多,近年开始对ECM降解的研究也日益深入,但是在肝纤维化临床治疗领域,并没有取得明显的进步。中药肝复康是本校病理生理教研室多年来通过反复实验总结出的抗纤维化经验方,本试验拟从ECM降解的角度探讨肝复康的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组(C)、模型组(M)、模型对照组(MC)、高剂量治疗组(HT)、中剂量治疗组(MT)、低剂量治疗组(LT)和预防组(P)。除正常对照组外,余鼠用皮下注射四氯化碳的方法复制大鼠肝纤维化模型。处死各组大鼠后测其血清丙氨酸转氨酶( alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶( aspartate- aminotransferase,AST)、白蛋白(albumin,A)、球蛋白(globulin, G)的含量;HE染色法观察肝组织病理学变化;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;逆转录聚合酶链(reverse transcription polymerase- chain reaction, RT-PCR)法观察基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、Ш型胶原(CollagenШ)mRNA表达量的变化。同期正常饮食饲养大鼠作对照。结果:1.血清学指标:与模型组比较,肝复康治疗后可明显减少ALT及AST的释放,升高血清白蛋白,降低血清球蛋白,升高白球比,以中剂量治疗组最为显著。2.肝组织病理学变化:与模型组比较,肝复康治疗组肝细胞变性及坏死程度减轻,汇管区及小叶间仅有少量纤维组织增生,纤维间隔细小,尤以中剂量治疗组差异显著。3.肝组织免疫组化染色:模型组α-SMA主要表达于汇管区及纤维间隔,且呈长椭圆形或梭形,免疫组织化学染色面积显著高于正常对照组。中剂量治疗组α-SMA表达较模型组明显下降,与正常对照组无明显差异。4.肝组织TIMP-1和CollagenШmRNA的表达:模型组大鼠肝组织TIMP-1 mRNA表达较正常对照组明显上调。模型对照组、高剂量治疗组、中剂量治疗组和低剂量治疗组大鼠肝组织TIMP-1 mRNA表达较模型组均显著下调,其中以中剂量治疗组最为明显,预防组大鼠肝组织TIMP-1 mRNA表达较模型组没有显著性差异。模型组大鼠肝组织CollagenШmRNA表达较正常对照组明显上调。中剂量治疗组大鼠肝组织CollagenШmRNA表达较模型组明显下调,有显著性差异,且与正常对照组比较无显著性差异。结论:1.肝复康能显著降低CCl4诱导的大鼠肝纤维化的程度,降低TIMP-1及CollagenШmRNA表达水平,对肝纤维化有良好的治疗作用。2.肝复康对CCl4诱导的肝纤维化有疗效,作用机制可能与其下调TIMP-1表达水平,从而减轻了其对MMPs的抑制有关。
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