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本研究旨在探讨GH／IGF-I和雌激素对子宫发育和功能的调节机制。实验采用相对定量RT-PCR方法检测了蛋鸡开产、产蛋高峰和产蛋后期子宫GHR、IGF-IR和ER-αmRNA表达的变化，并测定了日粮添加CT2000和大豆黄酮对蛋鸡子宫GHR、IGF-IR和ER-αmRNA表达的影响。此外，通过体外实验进一步观察了大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡子宫粘膜细胞增殖和基因表达的影响。 本实验研究分为两大部分： 一、GH／IGF-I受体和雌激素受体在蛋鸡子宫的表达 随机选取105、209、385和500日龄伊莎褐蛋鸡各10羽采样。用RT-PCR的方法，检测子宫组织中ER-α、GHR、IGF-IR mRNA表达的变化。结果显示： 209日龄、385日龄、500日龄蛋鸡产道相对重量均极显著高于105日龄(P＜0.01，n=10)。209日龄和385日龄无显著差异，500日龄时显著下降(P＜0.05，n=10)。 209日龄和385日龄蛋鸡子宫ER-αmRNA对β-actin mRNA的相对丰度与105日龄相比分别降低54.37％(P＜0.05，n=6)和55.25％(P＜0.05，n=6)，500日龄蛋鸡子宫ER-αmRNA对β-actin mRNA的相对丰度与209日龄相比无显著变化(P＞0.05，n=6)。子宫GHR和IGF-IR mRNA对β-actin mRNA的相对丰度在各日龄无显著差异(P＞0.05，n=6)。 二、CT2000和大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡子宫GH／IGF-I受体和雌激素受体的影响 1、CT2000和大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡子宫基因表达的影响 448日龄伊莎褐蛋鸡，随机分为对照组、CT2000组和大豆黄酮组，对照组饲喂基础日粮，CT2000组在基础日粮中添加400mg／kg CT2000，大豆黄酮组在基础日粮中添加10mg／kg大豆黄酮。试验鸡常规饲养管理。预试1周，实验期为9周。用半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法，检测子宫组织中ER-α、GHR、IGF-IR mRNA表达的变化。结果显示： 产蛋后期蛋鸡添喂CT2000和大豆黄酮均能显著增加产道重量。其中，CT2000组产道重量增加了14.10％(P＜0.05，n=15)，DA组产道重量增加了23.78％(P＜0.01， 朱赛GH／IGF－I受体和雌激素受体在蛋鸡子宫中的表达n—15），CT2000和 DA组之间无显著差异。说明 Cn000和大豆黄酮可以促进产道发育。 CT2000组子宫 EL a WA相对丰度与对照组相 匕降低 33．200（P＜0．05，沪9），GHR和mF－IR InRN的表达水平无显著变化o叩．05，，9）。大豆黄6N组子宫 Gmm删A的相对丰度降低47．190（P＜0．05，。9），IGFJR MA的相对丰度降低37．18O（P＜0．05，，9），6 ER a mRNA的表达水平无显著差异（P＞0．05，n—9）。提示 CT2000和大豆黄酮可能通过下调有关受体的表达而影响子宫发育。2、大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡子宫粘膜细胞增殖和基因表达的影响 选取500日龄左右产蛋后期蛋鸡，取子宫粘膜体外细胞培养，细胞贴壁后用不同浓度的大豆黄酮处理24，J、时，用MTT法测定细胞增殖活性，并用相对定量RTPCR方法；以p一办二作为内标，测定i．ui．u－IR mRNmRNA的相对丰度。结果表明： 10“M的大豆黄酮能显著促进子宫粘膜细胞增殖，OD值比对照组上升 17，sloo用刀5，。n），＊－’M和＊’‘M的大豆黄酮对细胞增殖活性无显著影响oJ．05，n＝ll）。提示一定剂量的大豆黄酮可以促进子宫粘膜细胞增殖。 10“M大豆黄酮组 IGPIR InRNA表达水平与空白对照组相比有升高的趋势，但不显著（P＝0．095。n。5）。