生防芽孢杆菌HAB-2菌剂的应用及合果芋细菌性软腐病菌的鉴定

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生防芽孢杆菌HAB-2菌株是本实验室从棉花(Gossypium spp.)的根际土壤中分离到的一株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),前期研究表明HAB-2菌株对多种植物病原菌有良好的抑制效果;对农作物还具有一定的促生长作用;其代谢产物具有活性高、毒性小的优点。为进一步明确该菌株的生防效果和应用前景,本研究制备了HAB-2粉剂、HAB-2水溶性肥和HAB-2可湿性粉剂,并分别针对橡胶树(Hevea brasiliensis)、水稻(Oryza sativa)和苦瓜(Momordica charantia)进行应用性试验,试验结果表明:HAB-2粉剂对橡胶树炭疽菌(Colletotrichum glosporioides)的抑菌率为54.06%,能抑制病菌对橡胶树叶片的侵染。HAB-2水溶性肥对水稻苗施用后,水稻的分蘖数增加了112.50%,株高增长161.27%,千粒质量增加了7.95%。HAB-2可湿性粉剂对苦瓜植株使用后,苦瓜植株叶片的鲜重、干重、茎长、叶面积、硝酸还原酶活性、过氧化氢酶活性、Vc含量、叶绿素、多糖和全氮含量均有一定程度增加,硝态氮含量降低。HAB-2菌剂在防治植物病害和促进植物生长方面具有很大潜力。合果芋(Syngonium podophyllum)属天南星科,是室内常见的观叶植物。本课题组在海南省海南大学校园内的合果芋叶片上发现细菌性软腐病,并从病叶成功分离得到菌株L6,经验证L6是引起该病的病原菌。根据形态学观察和生理生化研究表明:L6为革兰氏阴性菌,呈短杆状、周生鞭毛;菌落形态呈乳白色,圆形隆起状,表面和边缘光滑;可以利用柠檬酸盐,不能利用山梨醇,可以微弱利用麦芽糖,可以利用乳糖、果糖、木糖、肌醇、葡萄糖、蔗糖和甘油作为碳源;可在KB(King’s B)培养基上产生荧光色素;可将明胶分解为液态状;可在CVP(crystal violet pectate)培养基上产生杯状凹陷。分子鉴定结果表明,L6菌株的16S rRNA序列、pelY基因序列、pmrA基因序列分别与P.aroidearum SCRI 109菌株的16S rRNA序列(GenBank:NR159926.1)一致性为99.79%,与P.aroidearum PC1菌株pelY基因(GenBank:CP001657.1)一致性达到98.17%,与P.aroidearum KC20菌株的pmrA基因序列(GenBank:KY021016.1)一致性为98.80%。基于16Sr RNA、pelY、pmrA基因序列的系统发育树分析,L6均与P.aroidearum种群的进化距离最近。结合形态学和生理生化水平及分子生物学鉴定法将菌株L6鉴定为P.aroidearum。通过剪叶接种法对L6菌株进行寄主范围测定,结果表明L6菌株可以侵染水稻(Oryza sativa)、玉米(Zea mays)、橡胶树(Hevea brasiliensis)、柑橘(Citrus reticulata)等18种植物叶片,无法侵染印度紫檀(Pterocarpus indicus)、大青(Clerodendrum cyrtophyllum)、白菜(Brassica pekinensis)、甘蓝(Brassica oleracea)、辣椒(Capsicum annuum)和番茄(Solanum lycopersicum)叶片,侵染率达76.0%,其寄主范围较广泛。这是首次在合果芋叶片上发现这一病原菌产生的病害,并通过试验发现该病原菌寄主范围广,致病力强,这要引起我们高度的重视,以防范该病原菌在我国农作物中的流行危害,加强对该病害的有效防控。
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