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第一部分Intersectin1-L在癫痫脑组织的表达目的:癫痫是神经系统常见病,部分癫痫患者经药物治疗后不能控制其发作而成为难治性癫痫。癫痫发作的病变基础是神经元出现高度的异常同步放电,但其确切的发病机制尚不完全清楚。生理情况下,神经元兴奋性/抑制性处于动态平衡,神经递质释放异常可能打破这种平衡,导致神经元兴奋性增加,癫痫发作。Intersectin1-L是一种具有多个功能域的支架蛋白,它在中枢神经元特异的表达,对神经递质的释放起着重要作用。本研究的主要目的是检测intersectin1-L在癫痫脑组织中的表达变化特征。方法:1、人脑组织标本来源于课题组前期建立的脑库:其中癫痫组来源于难治性癫痫需采用手术治疗的患者脑组织;对照组脑组织则是颅脑外伤经手术治疗者;2、动物脑组织标本采集:(1)匹罗卡品诱导建立的颞叶癫痫动物模型;(2)杏仁核电点燃癫痫动物模型;3、采取的检测技术:免疫荧光进行定位检测;免疫组化对intersectin1-L的表达部位和量进行检测;western-blot对蛋白表达量进行检测。结果:1、癫痫患者脑组织中的表达:(1)免疫荧光定位检测结果提示intersectin1-L在人脑组织皮层神经元表达;(2)免疫组化结果为intersectin1-L在人脑组织皮层神经元表达;但与对照组相比较,癫痫组脑组织的平均光密度值(OD)明显增高(p<0.05);(3)western-blot检测:癫痫患者脑组织中的intersectin1-L表达水平增高(p<0.05)。2、癫痫动物模型中的表达:(1)免疫荧光定位检测结果提示intersectin1-L在匹罗卡品癫痫动物模型脑组织皮层/海马神经元表达;(2)免疫组化结果为intersectin1-L在匹罗卡品癫痫动物模型脑组织皮层/海马神经元表达,这与免疫荧光结果一致,但与对照组相比较,癫痫组脑组织(匹罗卡品癫痫动物模型)的平均光密度值(OD)明显增高(p<0.05);(3)western-blot检测,癫痫动物模型(匹罗卡品/杏仁核电点燃)脑组织中的intersectin1-L的表达水平增高(p<0.05)。结论:Intersectin1-L在癫痫患者及癫痫动物模型(匹罗卡品/杏仁核电点燃)脑组织的神经元上表达,其表达量增加。第二部分地西泮/劳拉西泮治疗癫痫持续状态meta分析目的:系统评价地西泮与劳拉西泮治疗癫痫持续状态的有效性及安全性的差异。方法:检索Pubmed、EMBASE、Cochrane图书馆及Google学术搜索等数据库,检索时间范围设定为建库至2015年2月28日,按照PICOS原则,收集有关比较地西泮与劳拉西泮治疗癫痫持续状态有效性和安全性的随机对照试验研究,采用Jadad评分对纳入的文献进行评分,判断研究是否为高质量研究(避免低质量研究对本结果产生影响)。由2名研究者按Cochrane评价方法筛选并评价文献(有争议者经讨论后得出一致意见)、提取基本资料及相关数据(包括实验设计、研究对象的基本特征及研究结果),采用Rev Man 5.2软件对这两种药物治疗癫痫持续状态的有效性及可能产生不良反应包括呼吸抑制、意识改变及心血管方面的并发症等三种不良反应的发生率差异进行荟萃分析。结果:根据纳入排除标准,共有4个随机对照试验纳入本研究,包括605例患者,其中311例患者地西泮治疗,294例为劳拉西泮治疗。纳入的研究Jadda评分均≥3分,提示为高质量研究。荟萃分析结果显示(1)地西泮治疗癫痫持续状态效果不差于劳拉西泮治疗(OR=0.68,95% CI=0.46-1.00, Z=1.95, P=0.05);(2)地西泮和劳拉西泮这两种药物常见的不良反应包括呼吸抑制、意识改变及心血管方面的并发症等三种不良反应的发生率差异经荟萃分析无统计学意义(P>0.05)。但是,就这二种药物本身而言,和地西泮相比,劳拉西泮代谢快,反复用药更易引起癫痫持续状态复发或导致难治性癫痫持续状态;同时劳拉西泮需要在低温条件下保存,使用极为不便。结论:治疗癫痫持续状态时,静脉注射地西泮的疗效不比劳拉西泮差,而二者不良事件发生率是一样的。综上所述,治疗癫痫持续状态时,结合药物的有效性、安全性及药物本身的特性等因素考虑,地西泮更优于劳拉西泮。