电针关元、足三里对亚急性衰老大鼠神经免疫调节的实验研究

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目的为了解决21世纪老龄化带来的负担,本实验采用多种现代研究技术,以D-半乳糖致衰大鼠为研究对象,探讨针刺强壮穴对中枢神经系统的免疫调节作用,并比较两种刺激参数效应的差异,为针灸临床研究探索提供最佳针刺方法,并为进一步的深入研究提供实验依据。方法三月龄SD大鼠40只,随机数表法选取10只为正常对照组(A组),颈背部皮下注射生理盐水125mg/kg·d,40天,另30只行D-半乳糖125mg/kg·d颈背部皮下注射40天复制衰老模型,大鼠经水迷宫实验筛选,模型组大鼠到达平台的时间显著延长,进入盲端的次数增多,说明造模成功。将造模成功的30只大鼠随机数表法分为衰老模型组(B组,10只),常规电针组(C组,10只),强刺激电针组(D组,10只)。正常对照组、衰老模型组不予治疗;C组,大鼠穿自制鼠衣,参照1992年中国针灸学会实验针灸研究会制定的“实验动物针灸穴位图谱”取关元、足三里穴。15mm×Φ0.32mm华佗牌毫针针刺,接G6805-Ⅱ型电针治疗仪,关元接负极,足三里接正极,双侧足三里隔日交替使用,选用连续波,频率2Hz,强度为1mA。每次通电30分钟,每天1次,每周6次,共治疗4周,末次治疗结束后第二天取材。D组电针治疗和取材方法同C组,但针刺时间为5分钟,强度为4.5mA。疗程结束摘眼球采血,用放射免疫法检测各组血清白介素6(IL-6)的含量。大鼠处死后,取脑组织,原位杂交法检测神经肽Y基因(NPY mRNA)表达水平,免疫组化SABC法检测大鼠白介素6受体(IL-6R)的表达水平,运用图象分析系统分析所检测的NPYmRNA、IL-6R免疫阳性物的表达,并对数据进行统计分析。结果1.与正常对照组相比,致衰大鼠下丘脑室旁核NPY mRNA水平降低、血清IL-6、下丘脑室旁核IL-6R水平升高,统计分析处理差异具有显著性(P<0.05)2.与衰老模型组相比,两种强度电针治疗组大鼠下丘脑室旁核NPYmRNA升高、血清IL-6、下丘脑室旁核IL-6R水平均降低,统计分析处理差异具有显著性(P<0.05)3.常规电针组(1mA)和强刺激电针组(4.5mA)两组比较统计分析处理差异具有显著性(P<0.05)。结论1.针刺强壮穴能显著提高衰老大鼠减少的NPYmRNA表达、降低衰老大鼠表达过高的IL-6R水平及外周血中IL-6含量,这可能是针刺激活大鼠大脑中枢神经系统而增强内分泌免疫调节作用。2.常规电针与强刺激电针疗效有明显差异,强刺激电针电流刺激强度虽较高而不易耐受,但疗效优于常规电针,且时间短暂,可以为今后的针灸治疗提供新的思路。3.本课题为阐释针刺强壮穴改善衰老状态神经免疫的作用机制提供了科学的实验依据,体现了其固护正气为本的思想优势。
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