目的:邻苯二甲酸二丁酯(DBP)是能够引起机体雄激素及其受体信号通路调节功能受损的一种常见环境内分泌干扰物。孕妇DBP暴露一直以来被认为与后代尿道下裂发病存在关联。本研究通过研究大鼠怀孕期间暴露于DBP引起后代雄性子鼠发生尿道下裂的模型,检测DBP暴露子鼠生殖结节尿路上皮组织的自噬和EMT指标,并研究DBP处理、AR信号通路、细胞自噬以及EMT间的关联。期望能够揭示孕期DBP暴露引起后代尿道下裂发生的潜在机制。方法:第一部分:通过免疫组化分析(IHC)、蛋白免疫印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR方法,检测了在DBP暴露引起的尿道下裂组以及食用油暴露的正常对照组子鼠,生殖结节尿路上皮组织自噬相关指标Beclin1和LC3B的表达改变,并用同样方法检测了EMT相关指标表达改变。第二部分:通过放射性免疫测定法检测了雄性子鼠血清睾酮浓度。通过免疫组化分析、Western blot和实时荧光定量PCR方法检测比较了实验组和对照组间子鼠生殖结节尿路上皮组织AR蛋白表达量的不同。体外通过质粒转染,构建了AR过表达的细胞株SV-HUC-AR。通过Western和实时荧光定量PCR方法检测:DBP处理下外源性表达AR的细胞株SV-HUC-AR和不表达AR的细胞株SV-HUC-V自噬相关标志物的表达。第三部分:使用Western和实时荧光定量PCR方法,检测自噬诱导剂氯喹CQ或自噬抑制剂雷帕霉素RAPA的添加对DBP促进尿路上皮细胞发生EMT效应的影响。并用同样的方法检测自噬溶酶体抑制剂与蛋白酶抑制剂的添加对DBP诱导的E-cadherin蛋白降解的影响。结果:第一部分:DBP孕期暴露成功诱导了后代雄性子鼠发生尿道下裂。孕期DBP暴露显著提高了子鼠生殖结节尿路上皮组织自噬Beclin1和LC3B的表达,DBP暴露促进了上皮指标E-cadherin表达下降,间质指标Snail,N-cadherin以及β-cadherin表达升高。第二部分:孕期DBP暴露显著降低了后代雄性子鼠血清睾酮浓度以及生殖结节尿路上皮组织AR表达。AR过表达抑制了DBP诱导的自噬。第三部分:自噬抑制剂氯喹CQ显著抑制了DBP诱导的EMT,上皮标志E-cad表达上升而间质标志N-cad表达显著下降。自噬-溶酶体途径抑制剂CQ能够显著抑制DBP诱导的E-cadherin的表达降低,而蛋白酶抑制剂MG-132则不能抑制DBP诱导的上皮细胞标志E-cadherin的表达降低。结论:孕期母鼠DBP暴露会引起后代子鼠显著上升的尿道下裂致畸率。在该过程中,DBP诱导的生殖结节尿路上皮自噬以及EMT水平改变可能扮演着重要的角色。DBP相关的雄激素以及雄激素受体通路功能受损会促进尿路上皮细胞发生自噬改变。自噬能够促进DBP诱导的尿路上皮细胞EMT的发生。在此过程中,自噬溶酶体途径引起的E-cadherin降解在DBP诱导的EMT过程中扮演着重要角色。