大鼠MnPO注射AngⅡ对肾神经元型一氧化氮合酶及Na+,K+-ATPase活性的影响

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目的:探讨激动大鼠正中视前核(median preoptic nucleus,MnPO)的血管紧张素Ⅰ型受体(angiotensin receptor type Ⅰ,AT1)对肾脏水、钠排泄功能的影响,以及此影响分别与肾脏Na+,K+-ATPase活性和肾神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxidesynthase,nNOS)活性变化的关系。方法:实验用成年SD大鼠。大鼠麻醉后行膀胱造瘘术,用以收集尿液,测量尿流量,并采用分光光度法检测尿中的钠浓度,计算尿钠排出量。麻醉动物俯卧固定在鼠脑立体定位仪上进行MnPO定位和微量注射。动物随机分为3组:aCSF组相隔10min先后两次注射人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,aCSF),每次250nl;AngⅡ组先后注射aCSF250nl和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)20ng/250nl;Losartan组先后注射注射氯沙坦(Losartan)5μg/250nl和AngⅡ20ng/250nl。大鼠分别在中枢注射后第15min、45min、60min、75min、105min和145min时处死,摘取肾脏和全脑。鼠脑固定处理后用于MnPO定位的鉴定,摘取的肾脏取肾皮质组织,制备组织匀浆,定磷法检测Na+,K+-ATPase活性,分光光度法检测nNOS活性。结果:1.与aCSF组比较,AngⅡ组的尿流量(ml/min)和尿钠排出量(μmol/min)均在MnPO注射后15min开始升高,并在注射后的60min达到峰值,随后逐渐回落,在注射后145min基本恢复至注射前水平,而Losartan组在注射后145min内,其尿流量和尿钠排出量均无显著性变化;2. AngⅡ组与aCSF组比较,其肾皮质Na+,K+-ATPase活性MnPO注射后15min开始降低,并在注射后的60min达到最低值,在注射后145min回升至注射前水平,而Losartan组在注射后145min内,其肾皮质Na+,K+-ATPase活性无显著性变化;3.在AngⅡ组MnPO注射后60min的时间点,其尿钠排出量与肾皮质Na+,K+-ATPase活性的相关系数r=-0.952, P<0.01;4.与aCSF组比较,AngⅡ组的肾皮质nNOS活性在MnPO注射后15min开始升高,并在注射后的60min达到峰值,随后回落,在注射后145min恢复至注射前水平,而Losartan组在注射后145min内,其肾皮质nNOS活性无显著性变化;5.在AngⅡ组MnPO注射后60min的时间点,其尿钠排出量与肾皮质nNOS活性的相关系数r=0.956,P<0.01。结论:(1)大鼠MnPO微量注射AngⅡ可引发排钠利尿效应;(2)MnPO微量注射AngⅡ引发的排钠利尿效应是通过激动AT1受体实现的;(3)激动MnPO的AT1受体远距离影响肾脏的排钠利尿效应涉及肾脏Na+,K+-ATPase活性降低这一环节;(4)激动MnPO的AT1受体可使肾脏nNOS活性增强,排钠利尿效应与此有关。
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