目的：　　 建立磁性氧化铁(Fe3O4)纳米粒子-单克隆抗体复合探针免疫组织化学法(Fe3O4-IHC)，以传统的基于辣根过氧化物酶(HRP)的免疫组化法(HRP-IHC)为参照，对比分析食管鳞癌(ESCC)组织EGFR表达检测的精准性。　　 方法：　　 将Fe3O4纳米粒子与抗EGFR抗体通过偶联剂：EDC和NHS连接，加入BSA(牛血清白蛋白)封闭抗体与纳米粒子间空隙制备出免疫组化用复合探针；将探针在待检的EGFR阳性片上孵育，利用纳米粒子类过氧化物酶催化活性催化DAB染色，镜检评估阳性片染色情况，建立Fe3O4-IHC法，半定量检测食管鳞癌术后组织标本EGFR表达水平。同时应用常规免疫组化法对相同组织标本行重复检测，比对传统方法进行分析。　　 结果：　　 仅在纳米粒子与抗体结合，同时纳米粒子被BSA包被的情况下，探针方可特异性结合肿瘤细胞表面EGFR，而无非特异性染色。HRP-IHC和Fe3O4-IHC两种方法对EGFR在35例食管癌组织中表达率的检测结果分别为57.1％和48.6％。以HRP-IHC为标准比较，Fe3O4-IHC方法检测ESCC组织EGFR的灵敏度为85％；特异度为100％；约登指数为0.85；阳性预测值为100％；阴性预测值为83.3％；粗一致性为91.4％。两种方法的等级资料R检验R为0.419+/0.098(95％可信区间)，Spearman等级相关检验p<0.05，提示Fe3O4-IHC是不劣于IHC的检测手段。　　 结论：　　 BSA包被的纳米氧化铁-单抗复合探针同时具备良好的靶向性及过氧化物酶样活性的优点，完全满足免疫组化探针的需求。Fe3O4-IHC法检测ESCC组织EGFR表达状态与HRP-IHC一致性佳，操作简单、性能稳定。