脂多糖作用于人蜕膜细胞后COX-2表达的研究

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenjuanliu_b06213
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目的:研究体外培养的人蜕膜细胞,经不同浓度脂多糖(LPS)作用后,蜕膜细胞中的炎性因子诱导酶环氧合酶2(COX-2)表达差异,探索COX-2过度表达与蜕膜细胞感染的相关性。   方法:收集正常早孕期人工流产术中的蜕膜组织,进行体外原代细胞培养。当蜕膜细培养3-4代后将其分成5组,分别加入脂多糖使其终浓度分别为0ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml。作用蜕膜细胞48小时后,1)通过激光共聚焦-免疫荧光技术检测COX-2蛋白在蜕膜细胞中的表达差异2)在收集各组的蜕膜细胞提取mRNA,并采用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测各组中COX-2 mRNA的表达水平,并分析各组间的表达有无统计学差异。   结果:1)通过激光共聚焦-免疫荧光染色技术检测到各组人蜕膜细胞后,细胞质及细胞核中均有COX-2蛋白表达,且加入LPS作用后各实验组与对照组相比,COX-2表达差异显著,P<0.05,有统计学意义;且随着LPS浓度逐渐升高,COX-2蛋白表达逐渐增强。2)不同浓度LPS作用蜕膜细胞后,各实验组与对照组相比较,COX-2mRNA表达差异显著,P<0.05,有统计学意义;且随着LPS浓度的增加,COX-2mRNA表达逐渐增强。   结论:1)LPS作用于体外培养的人蜕膜细胞后,COX-2的蛋白表达增加,且随着LPS的浓度逐渐增加COX-2蛋白表达逐渐增强;2)LPS作用于体外培养的人蜕膜细胞后,COX-2的mRNA表达增加,且随着LPS的浓度逐渐增加COX-2mRNA表达逐渐增强。
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