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硫氧还蛋白(Tioredoxin,Trx)是生物体内广泛存在的小分子巯基蛋白,在控制细胞氧化还原平衡、促进细胞生长、抑制细胞凋亡以及调节基因表达的过程中发挥着重要的作用。本试验对重要农业害虫亚洲玉米螟的硫氧还蛋白基因进行了研究,以期为探明昆虫该蛋白对氧化应激损伤的阻抗和保护作用机制提供理论依据。主要研究结果如下:(1)利用RT-PCR和3’RACE-PCR方法扩增获得了亚洲玉米螟Trx基因的cDNA片段。序列分析结果表明,该基因片段编码区长为321 bp,编码区推导表达106个氨基酸残基,预测所编码的蛋白质分子量为11.85 kD。同源性分析发现,亚洲玉米螟与其它昆虫的Trx蛋白均具备活性位点CGPC。亚洲玉米螟与其它昆虫Trx的氨基酸序列一致性在60%~96%之间。证明获得的亚洲玉米螟Trx属于硫氧还蛋白家族,该基因暂命名为OfurTrx,已在Genbank上登录,登录号为KJ744039.1。(2)采用qPCR方法,研究了OfurTrx基因在亚洲玉米螟不同发育期和组织中的表达情况。结果表明,OfurTrx基因在亚洲玉米螟不同发育期皆有表达,但表达量存在差异。其中4龄幼虫期以4龄24 h的表达水平最高;5龄幼虫期以5龄0 h表达水平最高,但随着幼虫的生长发育其表达水平基本呈下降趋势;蛹期3日龄表达水平较低,5日龄达到最高;成虫期表达水平较低。在幼虫不同组织中,OfurTrx普遍存在于表皮、脂肪体、头部和中肠中,但以表皮中表达量最高,其次为脂肪体,头部和中肠的表达量相对较低。(3)利用qPCR方法,研究了高温、低温、饥饿、紫外线照射、机械损伤、双氧水等逆境条件处理后,OfurTrx基因在5龄亚洲玉米螟幼虫中的转录表达情况。结果表明,除了紫外线照射外,其它逆境条件刺激对OfurTrx基因的转录表达均表现出很强的促进作用。(4)通过注射激素的方法,研究了保幼激素和蜕皮激素对5龄亚洲玉米螟幼虫OfurTrx基因表达的影响。结果表明,注射保幼激素类似物和蜕皮激素对OfurTrx的转录表达具有显著的调控作用,激素处理30 min均表现出显著的促进作用,但随着时间的延长,注射蜕皮激素2 h、注射保幼激素1 h,OfurTrx的表达则均被抑制。(5)为进一步明确蜕皮激素对OfurTrx基因表达的调控机制,本研究利用体外合成蜕皮激素受体EcR(ecdysone reponse)和超气门蛋白USP(ultraspiracle isoform)双链RNA,体外注射入5龄24 h幼虫体内。结果发现干扰蜕皮激素受体后,ecr和usp基因的表达量显著下降。同时对蜕皮激素受体干扰组注射蜕皮激素,结果发现OfurTrx基因的表达量显著上调。这些结果表明,蜕皮激素具有抑制OfurTrx基因表达的调控作用。