健康人体的肠道内栖息着大量的细菌,其优势菌群和次要菌群保持动态平衡,维持肠道正常的营养吸收、物质转化和生理生化功能,并且肠道菌群作为一个系统与机体其他系统协同维护机体健康。已有大量的研究表明,丁酸梭菌是人体肠道中重要的益生菌成分之一,能够抑制肠道内有害菌和腐败菌的增殖和生长,具有预防和治疗肠道疾病及调节肠道微生态平衡等重要作用。本研究旨在分离来源于健康人肠道中的丁酸梭菌,优化其培养工艺,最终考察其与嗜黏蛋白阿克曼菌分别对糖尿病小鼠的影响。首先,在健康人提供的粪便中,通过特异引物PCR鉴定和丁酸梭菌特异性考察,使用梭菌增殖培养基考察丁酸梭菌的严格厌氧特性、碳源利用特性和菌体形态特征,筛选获得了符合丁酸梭菌特征的菌株,最终经过16SrRNA鉴定了 10株与丁酸梭菌相似度在99%以上的菌株（分别命名为GYJK-2021D1～D10）。首先,以菌体发酵液中丁酸和总短链脂肪酸（SCFAs）的含量为指标,对上述10株菌株进行培养产酸性能考察,最终发现其中1株菌种GYJK-2021D4的产酸特性优良。以药品“泰康宁”中的丁酸梭菌（命名为菌种YX）为阳性对照菌株,优化菌种GYJK-2021D4的培养工艺,以梭菌增殖培养基（RCM）为基础,利用单因素考察方法,确定最佳的碳源、氮源的种类和浓度分别为:葡萄糖0.3%、麦芽糊精0.3%、酵母提取物1.2%、大豆蛋白胨1.2%。结果表明,丁酸梭菌GYJK-2021D4的最佳培养温度是37℃,培养基最佳起始pH为6.5,最佳接种量为10%。随后使用优化丁酸梭菌培养基和AKK优化合成培养基分别考察了丁酸梭菌GYJK-2021D4和嗜黏蛋白阿克曼菌GYJK-2021A1（以下简称AKK菌）的发酵罐培养工艺。其次,建立小鼠Ⅰ型糖尿病模型,用新鲜丁酸梭菌和AKK菌液灌胃以考察其对糖尿病小鼠的生理指标改善作用,考察因素包括小鼠空腹血糖、血脂代谢指标和肠道菌群结构。本研究以ICR小鼠作为复制Ⅰ型糖尿病模型动物,使用0.04 mg/10g的造模剂量给小鼠连续5天腹腔注射链脲佐菌素,以空腹血糖大于11.1 mmoL/L为成模小鼠,分为三组（模型组/AKK菌组/丁酸梭菌组）,每组10只,模型组给予生理盐水,AKK菌组给予菌种A1菌液（OD600 1.0～1.3）,丁酸梭菌组给予菌种D4菌液（OD600 1.3～1.6）,灌胃0.4mL/只,每天2次,连续灌胃14天。灌胃结束后,检测各组小鼠的空腹血糖和血脂指标;并且解剖小鼠采集新鲜肠道物,使用Illumina高通量测序技术分析小鼠肠道的菌群特征。结果表明,益生菌AKK菌和丁酸梭菌具有改善Ⅰ型糖尿病小鼠空腹血糖和血脂的功能,并形成新的肠道菌群结构特征。该研究为开发治疗糖尿病的活菌制剂奠定了基础。