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目的目前,全国育龄夫妇约有2.3亿人,不孕不育发生率为15%一20%,也就是说至少有一千万个家庭受生育难题的困扰。据国家卫生部门的调查数据表明,不孕不育症患者呈上升趋势,目前我国有5.2%的夫妇在婚后要面对不孕不育症的现实,生育问题仍旧是我国各种悲喜剧的重要源头之一。即使在大中城市,也会有许多人因为没有生育而离婚。据国家研究中心对北京市1 000个离婚者的统计,其中有约30%的人是因为不能生育的原因而导致离婚的。思想观念较为开明先进的北京尚且如此,其他地区就可想而知了。据统计,不孕不育症的发生率约占生育年龄妇女的15%~20%,其中,女方原因占50%,男方原因占30%,男女双方原因占10%,未查出病因者约为10%。因此,对于不孕不育的研究非常必要。目前关于肾虚所致的不孕不育的实验研究及临床报道较多,其研究也比较深入。但关于脾虚所致不育的实验研究报道极少,所以本课题从脾气亏虚入手研究不育有一定的现实意义和临床意义。本课题主要研究脾气虚对男性生殖功能的影响,为临床男性生殖功能障碍从脾论治提供理论和实验依据。方法选择健康wistar雄性大鼠40只,适应性饲养一周,将雄鼠按随机数字表法随机分为4组:正常组、模型组、五子衍宗丸组、四君子汤组。正常对照组不给予任何刺激,其余各组采用苦寒泻下加劳倦过度法(大黄灌胃加游泳法)复制大鼠脾气虚模型。造模完成后,五子衍宗丸组、四君子汤组分别连续给药21天,然后测定各组大鼠精子活率及密度,检测其血清胃泌素、D-木糖醇浓度,流式细胞仪检测各组大鼠睾丸生精细胞凋亡率、各级生精细胞百分比,统计分析各项指标变化的意义。结果1.精子参数测定:与正常组比较,模型组、五子衍宗丸组大鼠精子密度、精子活率均显著降低(P<0.01);四君子汤组大鼠精子密度显著降低(P<0.01),精子活率未见明显异常(P>0.05)。与模型组比较,五子衍宗丸组大鼠精子密度、精子活率均无显著差异(P>0.05);四君子汤组大鼠精子密度及精子活率显著升高(P<0.01),表明四君子汤可以显著提高模型大鼠精子数量和精子活率。与五子衍宗丸组比较,四君子汤组大鼠精子密度、精子活率均显著升高(P<0.05),表明四君子汤对提高模型大鼠精子密度及精子活率作用强于五子衍宗丸。各组大鼠精子畸形率之间比较无明显差异,提示脾气虚对大鼠精子畸形率影响不大。2.血清胃泌素、D-木糖醇浓度的测定:与正常组比较,模型组及五子衍宗丸组大鼠血清胃泌素、D-木糖醇浓度均显著降低(P<0.01),而四君子汤组大鼠则无明显差异(P>0.05)。与模型组比较,五子衍宗丸组大鼠血清胃泌素、D-木糖醇浓度均无显著差异(P>0.05);四君子汤组大鼠血清胃泌素、D-木糖醇浓度显著升高(P<0.01)。与五子衍宗丸组比较,四君子汤组大鼠血清胃泌素、D-木糖醇浓度均显著升高(P<0.05),说明四君子汤改善模型大鼠脾气虚的作用明显优于五子衍宗丸组。3.生精细胞凋亡率、各级生精细胞数量百分比的测定。①生精细胞凋亡率:与正常组比较,模型组及五子衍宗丸组大鼠生精细胞凋亡率显著升高(P<0.05),而四君子汤组则无显著差异(P>0.05)。与模型组比较,五子衍宗丸组大鼠生精细胞凋亡率无显著差异(P>0.05);四君子汤组大鼠生精细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。与五子衍宗丸组比较,四君子汤组大鼠生精细胞凋亡率显著降低(P<0.05),说明四君子汤抑制模型大鼠生精细胞凋亡率的作用明显优于五子衍宗丸组。②各级生精细胞数量百分比:与正常组比较,模型组大鼠1C(单倍体,主要包括精子细胞和精子)百分比显著降低(P<0.01),模型组和五子衍宗丸组大鼠4C(四倍体,主要包括初级精母细胞和G2期精原细胞)百分比显著降低(P<0.05),而四君子汤组大鼠各级生精细胞百分比则无显著差异(P>0.05)。与模型组比较,五子衍宗丸和四君子汤组大鼠1C百分比显著升高(P<0.05);四君子汤组大鼠4C百分比显著升高(P<0.05)。与五子衍宗丸组比较,四君子汤组大鼠4C百分比显著升高(P<0.05)。结论1.脾气虚可以通过降低血清胃泌素、D-木糖醇含量而间接影响其生殖功能。2.脾气虚可以通过降低精子数量、精子活率而影响其生殖功能。3.脾气虚可以通过降低各级生精细胞数量,导致精子生成障碍而影响其生殖功能。4.脾气虚可以通过促进雄性大鼠睾丸生精细胞凋亡,影响精子的发生发育而影响其生殖功能。5.四君子汤可以通过调整模型大鼠血清胃泌素与D-木糖醇含量、抑制睾丸生精细胞凋亡、调整各级生精细胞数量、提高精子质量而提高其生殖功能。6.实验结果表明,脾气虚可以降低雄性生殖功能,补益脾气可以使其生殖功能恢复,从而在实验上验证了脾气虚与生殖功能的关系。