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目的:肾脏是人体重要的排泄器官和内分泌器官,在维持机体内环境方面发挥重要作用。脂代谢紊乱是代谢性疾病的主要危险因素,动脉粥样硬化、脂肪肝和糖尿病等的发生发展都与之密切相关。近年来研究表明,脂代谢紊乱使机体处于慢性炎症和氧化应激状态,进而导致肾脏功能受损。高密度脂蛋白(HDL)作为动脉粥样硬化(As)预防因子而备受关注。近年来研究发现HDL失功能可加剧体内炎症、氧化应激状态,而B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BI)是HDL功能性受体,参与机体脂代谢的调节,SR-BI基因缺失会导致小鼠体内血脂紊乱、HDL功能异常及肾组织损伤。甲硫亚砜还原酶A(MsrA)是胞内特异性还原酶,其抗氧化功能对维持体内氧化还原状态平衡至关重要。实验室前期已发现慢病毒Lv-MsrA-GFP注射的小鼠,肝脏、心脏、肾脏等组织中MsrA均有明显升高,且在apoE基因敲除小鼠(ApoE-/-)体内能够通过调控肝脏脂质代谢活动,降低机体血脂水平,改善其炎症及氧化状态,延缓ApoE-/-小鼠As病程。本研究以高脂饲养的SR-BI基因敲除小鼠(SR-BI-/-)为模型,拟通过hMsrA高表达干预机体整体氧还状态而改善HDL功能,观察其改变对肾脏纤维化的影响并探究其相关机制。方法:选取雌性、10-11月龄普食喂养的野生型(WT)与SR-BI-/-小鼠进行基础状态的比较,通过采用生化酶法试剂盒检测小鼠血浆总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、甘油三酯(TG);连续动态法测定小鼠血浆对氧磷酶1(PON1)活性;肾脏组织石蜡切片行Masson染色观察肾脏形态学变化以分析小鼠肾脏纤维化状况;qPCR检测两种小鼠肾脏中氧化炎症及纤维化相关因子基因表达,即肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IV型胶原(COLIV)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP 9)等。利用实验室构建的重组质粒pWPI-GFP,pWPI-GFP-MsrA通过慢病毒包装获得慢病毒颗粒Lv-GFP,Lv-GFP-MsrA。将SR-BI-/-小鼠随机分为两组,每组七只,采取球后静脉注射的方式将慢病毒颗粒导入小鼠体内。普食喂养两周后,更换高脂饲料加速小鼠体内血脂紊乱状态,高脂八个月后,异氟烷麻醉取血,将小鼠安乐死,解剖后组织取材分析。利用qPCR及Western blotting验证MsrA在肾脏高表达;采用生化酶法试剂盒检测小鼠血浆TC、FC、TG;连续动态法测定小鼠PON1活性;肾脏组织石蜡切片行Masson染色观察肾脏形态学变化,观察小鼠肾脏纤维化状况;运用qPCR和Western Blotting检测纤维化相关分子Fn、COL I、COLⅣV、转化生长因子-β(TGF-β)、MMP2、MMP9及炎症氧化相关分子 PON1和IL-1 β,IL-6等mRNA及蛋白的表达。结果:基础状态下,SR-BI-/-小鼠血浆TC,FC含量明显高于野生型小鼠,TG无明显差异,抗氧化蛋白PON1含量明显低于WT小鼠。肾脏masson染色结果显示,与WT小鼠相比,SR-BI-/-肾纤维化较严重(P<0.05)。与WT小鼠相比,SR-BI-/-小鼠MsrA表达降低,TNF-α升高(P<0.01)。肾脏纤维化指标Collagen Ⅳ在SR-BI7-小鼠肾脏中表达高于WT(P<0.05),而降解细胞外基质的蛋白酶MMP 2及MMP 9的表达量在SR-BI-/-小鼠肾脏中的表达量明显低于WT小鼠(P<0.05)。利用慢病毒颗粒Lv-GFP和Lv-GFP-MsrA感染SR-BI-/-小鼠,高脂八月后安乐死。利用qPCR及Western blotting证实肾脏MsrA,结果显示高表达模型成功建立。与LV-GFP组相比,LV-MsrA组血浆中TC、FC及TG水平显著下降(P<0.01);Lv-MsrA组血浆PON1活性明显高于对照组(P<0.01);肾脏石蜡切片切片行Masson染色,结果显示Lv-MsrA组小鼠纤维化度明显减轻;肾脏qPCR检测结果显示,炎症因子IL-1β、IL-6,TNF-αmRNA显著下降(P<0.05),LV-MsrA 组 PON1 表达明显上升(P<0.05),而 Fn、COL1、COLⅣ、TGF-β 等纤维化相关基因mRNA相对表达量与对照组相比明显下降(P<0.05),MMP2、MMP9表达量显著增加(P<0.05)。结论:我们成功构建了 Lv-GFP-MsrA慢病毒载体,通过感染SR-BI-/-小鼠使MsrA在小鼠体内高表达,通过其抗氧化作用,调节体内血脂紊乱,降低机体炎症水平,改善氧化应激状态,减轻肾脏纤维化病变,延缓肾脏损伤进程。