【摘 要】
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目的:探究短时间高氧对肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）线粒体Ca2+/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）/沉默信息调节因子3（SIRT3）/超氧化物歧化酶2（SOD2）通路及活性氧（ROS）产生的影响。方法:将大鼠肺Ⅱ型上皮细胞株（RLE-6TN）同代细胞按随机数字表法分为高氧组（H组）、常氧组（C组）及线粒体钙通道拮抗剂组（HR组）。H组细胞置于氧浓度为90%的高氧箱中4小时,C组细胞置于常规细胞培养
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目的:探究短时间高氧对肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）线粒体Ca2+/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）/沉默信息调节因子3（SIRT3）/超氧化物歧化酶2（SOD2）通路及活性氧（ROS）产生的影响。方法:将大鼠肺Ⅱ型上皮细胞株（RLE-6TN）同代细胞按随机数字表法分为高氧组（H组）、常氧组（C组）及线粒体钙通道拮抗剂组（HR组）。H组细胞置于氧浓度为90%的高氧箱中4小时,C组细胞置于常规细胞培养箱中4小时,HR组细胞加入钌红（2umol/L）后置于氧浓度为90%的高氧箱中4小时。随后提取细胞信使RNA（messenger RNA,m RNA）,用实时荧光定量PCR法分析沉默信息调节因子（SIRT3）和超氧化物歧化酶2（SOD2）m RNA水平;用线粒体钙离子特异性荧光探针Rhod--2-AM检测细胞线粒体Ca2+含量;用辅酶Ⅰ酰胺腺嘌呤二核苷酸/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+/NADH）含量试剂盒测量NAD+和NADH的含量及比值;用活性氧检测试剂盒检测ROS水平。结果:与对照组及拮抗剂组比较,高氧组细胞NAD+含量、NAD+/NADH比值、SIRT3和SOD2m RNA表达水平显著降低,细胞线粒体Ca2+含量、NADH含量和ROS产量显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较,拮抗剂组细胞Ca2+含量、NAD+/NADH比值和ROS含量均明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）,细胞NAD+含量、NADH含量、SIRT3和SOD2m RNA表达水平差异均无统计学意义。结论:短时间高氧可通过AECII线粒体内Ca2+/NAD+/SIRT3/SOD2通路导致ROS产生增加。
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