鹅SCD1基因全长cDNA的克隆、组织表达及填饲对其表达的影响

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hms0741
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硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)是催化单不饱和脂肪酸合成的限速酶,同时也是甘油三酯、磷脂和胆固醇等合成的关键酶。靶向敲除SCDl基因的小鼠表现为消瘦且抑制食物诱导的肝脂肪变性,但SCD1是否在鹅肥肝形成中起着重要作用,尚未见报道。本研究以四川白鹅和朗德鹅为材料,从所构建的抑制消减杂交文库中筛选出SCD1基因的部分EST,以此为基础,通过5’-RACE和3’-RACE技术,首次扩增出了鹅SCD1基因cDNA的全长序列,应用生物信息学知识进行了序列分析,实时荧光定量PCR检测了SCD1在鹅各个组织中的表达情况及填饲对其在肝脏中的表达影响。得到如下研究结果:(1)鹅SCD1基因的cDNA序列全长为1228 bp,其中包含29 bp 5’-UTR,一个1074 bp编码357个氨基酸的开放阅读框和125 bp 3’-UTR。(2)分子进化树构建发现,鹅SCD1与其它物种高度保守,特别是与原鸡和斑胸草雀的同源性高达94%。(3)保守结构域分析发现,鹅SCD1的氨基酸序列跟其它物种一样,包含4个跨膜结构域和两个Delta9-FADS-likes结构;同时,具有三个保守的组氨酸结构域,且存在多个半胱氨酸位点。(4)实时定量PCR测得鹅的SCD1 mRNA的表达具有组织特异性,主要表达于肝脏、腹脂和皮质,而在其他组织表达极低。(5)填饲引起SCD1基因在四川白鹅和朗德鹅肝脏中的表达显著增加,其增加幅度与肝脏甘油三酯、血浆胰岛素水平和血浆极低密度脂蛋白(VLDL)显著正相关,表明SCD1基因的表达与鹅肥肝的形成具有密切的关系。
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