鱼油对脂多糖刺激仔猪下丘脑—垂体—肾上腺—免疫轴TLR4和NOD信号通路的调控作用

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本文研究了Toll样受体4(TLR4)和核苷酸结合寡聚域受体(NOD)信号通路相关基因在仔猪下丘脑-垂体-肾上腺-免疫轴的表达和分布,在此基础上,研究了鱼油对脂多糖(LPS)刺激仔猪下丘脑-垂体-肾上腺-免疫轴TLR4和NOD信号通路的调控作用。1、研究了TLR4和NOD信号通路相关基因在仔猪下丘脑-垂体-肾上腺-免疫轴的表达和分布,为从TLR4和NOD信号通路的角度研究仔猪免疫应激提供理论依据。选用12头283d(8.98±0.86kg)的杜洛克长白大白仔猪,屠宰,取下丘脑、垂体、肾上腺、脾脏、胸腺、肠道淋巴结等组织样品,测定TLR4和NOD信号通路及其下游基因的mRNA的表达水平。结果表明,TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、IL-1受体相关激酶1(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、p65核转录因子(p65NF-κB)和肿瘤坏死因子(TNF)-α的mRNA在免疫器官表达很高,在其他组织中表达相对较低。 NOD1、NOD2和受体互作蛋白2(RIP2)的mRNA在免疫器官表达很高,NOD1和NOD2在下丘脑中高表达,在其他组织中表达相对教低。结果表明:NOD和TLR4信号通路相关基因与免疫应激有高度的相关性。2、研究了鱼油对LPS刺激仔猪下丘脑-垂体-肾上腺-免疫轴的影响,并从TLR4和NOD信号通路的角度探讨其机制。选用24头283d(8.98±0.86kg)的杜洛克长白大白仔猪,采用22因子设计,主因子包括:(1)日粮处理(5%鱼油或5%玉米油);(2)免疫应激(注射LPS或生理盐水)。试验期为24d。在第24d,日粮组中一半的猪注射100μg/kg BW的LPS,另一半注射生理盐水作对照。在注射LPS后2和4h采血,4h采血后屠宰,取下丘脑、垂体、肾上腺、脾脏、胸腺和肠道淋巴结样品待测。结果表明:(1)鱼油缓解了LPS刺激2h后引起的TNF-α和皮质醇水平的提高(P <0.05),显著降低了血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)水平(P <0.001)。鱼油缓解了LPS刺激4h后引起的TNF-α水平的提高(P <0.05),显著降低了血浆ACTH水平(P <0.05)。(2)鱼油缓解了LPS刺激引起的下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和垂体阿黑皮素原(POMC)的mRNA表达水平的提高(P <0.05),显著提高了垂体CRHR1的mRNA表达水平(P <0.001)。(3)鱼油降低了下丘脑IRAK1、TRAF6、NOD1和TNF-α,垂体TLR4、IRAK1和TRAF6,肾上腺TLR4、MyD88、IRAK1、NOD2、RIP2、p65NFκB和TNF-α,脾脏TLR4、MyD88、IRAK1、TRAF6、NOD1和TNF-α,胸腺TLR4、IRAK1、TRAF6和RIP2,淋巴结TLR4和TRAF6的mRNA表达(P <0.05或P <0.10)。这些结果表明,鱼油通过抑制下丘脑-垂体-肾上腺-免疫轴TLR4和NOD信号通路,从而抑制下丘脑-垂体-肾上腺-免疫轴炎性因子的释放,进而抑制HPA轴的激活。
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