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[研究背景]
据WHO 2003年最新统计由于高血压所造成的死亡占总死亡人数的18%,每年有710万人死于与高血压相关的疾病,而且62%的中风与49%的心血管疾病与高血压相关。据估计目前中国有近2亿患者。其患病率1959年为5. 11 %,1979~1980年为7. 73%,1991年为11. 88 % ,1959~1979年的20年间,我国高血压患病人数平均每年增长140万,而1980~1991年的12年间,我国人群高血压患病率上升了4.15个百分点,绝对值增长了54%,平均每年增长320万,并有继续上升趋势。这种疾患对人民的健康已经造成了极大的影响。
经过科研工作者的不断努力,尤其是随着HGP计划的顺利进行及人类基因组草图的发布,人们已经认识到无论是继发性高血压还是原来认为无明确原因可查的原发性高血压,它们都在分子水平存在影响高血压发生的重要基因-易感基因。由于疾病发生中,外因——环境因素,总是通过机体的内因,即易感基因等起作用,所以,如何从分子水平明确这些“内因”,对于高血压的诊断和治疗具有非常重要的意义。对血管增殖抑制基因的研究也正是在这种背景下应运而生。
[目的]
血压是受多种因素决定和调控的,其中有功能的因素如血管平滑肌紧张性增强;结构的因素如细胞增殖、管壁增厚和管腔狭窄;以及调节的因素如神经、体液和信息传递等。这些平衡失调的变化不但是持续的、长期的,而且是渐进的,并进而导致高血压的发生、发展和并发症的出现。初步研究发现在高血压动物中,血管增殖抑制基因(Hyperplasia Suppressor Gene,HSG)的表达降低,而在正常血压动物中,该基因的表达正常。因而这种基因是可能是导致血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cells ,VSMCs)增生的主要原因。那么原发性高血压和非高血压冠心病搭桥患者在细胞水平以及分子水平上会具有什么样的差别?带着这样的问题,我们开始了进一步研究,以期得到分子水平上的证据,从而为高血压的诊断、治疗以及预防提供参考。
[方法]
本研究按照2005年中国高血压防治指南原发性高血压的诊断标准,选取冠心病行冠状动脉旁路移植术的患者54例为研究对象,分为高血压搭桥组(n=28)和正常血压搭桥组(n=26),尽量在病人入组时排除一切干扰研究分析的因素。术前留取两组患者静脉血,按照试剂盒要求采血,抗凝,用美国Dimension RL生化分析仪测定血液生化指标,用放射免疫测定法测定内皮素(Endothelin,ET)和肾素-血管紧张素-醛固酮系统(Renin-Angiotensin-Aldosterone system,RAAS)部分血管活性多肽:血浆肾素活性(Plasma Renin Activity,PRA)、血管紧张素I(Angiotensin I,Ang I)、血管紧张素II(Angiotensin II,Ang II)和醛固酮(Aldosterone,ALD)。术中留取新鲜桥血管,一部分做VSMCs培养,一部分放置液氮中冻存。用Trizol一步法提取白细胞,组织和细胞总RNA,Promega公司试剂盒反转录(Reverse Transcription,RT),应用Blast程序及Premier Primer 5.0软件对序列进行检索、同源性分析,设计HSG引物,在适当条件下行半定量PCR扩增反应,之后进行测序,观察两组患者HSG的表达情况。
[结果]
1.对两组患者的常规生化指标、血压等进行比较,结果发现正常血压搭桥组和高血压搭桥组的最大差别在于血压(P<0.01),其次是BMI(P<0.01),其它指标的差别没有统计学意义。两组患者的TG均值均高于正常值。对两组人群血液学相关指标进行相关性分析表明:BMI与GLU、BMI与SBP、BMI与DBP、CK-MB与LDH、LDH与AST、ALT与AST、ALT与DBP、AST与DBP、GLU与TG、CHO与HDL、CHO与LDL、SBP与DBP、ALD与CHO、ALD与LDL之间存在着明显的相关,其它指标之间无明显相关2.PRA、Ang I、Ang II、ALD和ET五种血管活性多肽均存在高血压搭桥组患者高于正常血压搭桥组患者的趋势,虽然这种差别没有统计学意义。对两组人群五种血管活性肽进行相关性分析表明,只有PRA与Ang I之间存在着明显的相关性(P<0.01)。而其它因子之间不存在明显的相关性。
3.采用半定量PCR,琼脂糖凝胶电泳,凝胶分析扫描观察到,HSG在高血压搭桥患者和正常血压搭桥患者WBC、血管组织和VSMCs的表达是有差别的:高血压搭桥组较正常血压搭桥组低(P<0.05)。相关性分析表明:血管HSG表达与BMI、SBP、DBP之间存在着明显的负相关。
[结论]
1.在高血压冠心病患者和正常血压冠心病患者之间,无论在WBC、VSMCs还是在血管组织,都存在HSG表达差别。
2.在血管组织中,HSG的表达与BMI、SBP和DBP呈负相关。
3.BMI与GLU、SBP和DBP都有明显的正相关,提示超重和肥胖在高血压的发生、发展中扮演着重要的角色。
4.高血压对心脏、肝脏和肾脏可能会造成损伤,其中一些相关的肝肾功能的检测,对于评价高血压的靶器官的损害可能具有重要的作用。
5.血管活性多肽,尤其是与心血管系统密切相关的ET和RAAS多肽,可以反映高血压和冠心病的发病情况和机体的代偿机制,对于合理地选用抗高血压药物提供参考。