多酚氧化酶(Polyphenols Oxidase,简称PPO)是一类以Cu2+为辅基的氧化还原酶,在组织发育过程中形成并贮存于叶绿体中。烟草中的PPO在调制过程中能催化氧化多酚类化合物为α—醌,发生棕色化反应,α—醌可聚合成黑色素,产生过深的颜色,不仅影响烟叶的外观质量,也使内部化学成分消耗过度,降低了内在质量。合理控制烟草中PPO的活性,在调制过程中可减少挂灰烟、黑烟和杂色烟,增加桔黄色上中等烟比例,增加烤烟的天然特征香气,降低刺激性。本研究以中烟100(中烟种子有限责任公司青岛分公司提供)为试验材料,通过烟叶浸泡法、叶柄浸泡法和叶面喷施法3种不同的抑制剂施用方式处理成熟期的烟叶,进行对比试验,测定PPO活性、总酚含量、绿原酸含量的变化以及对烟叶烘烤效果的影响。主要研究结果如下:1.测定了烟草生长各阶段PPO活性的变化。试验结果发现多酚氧化酶在烟草苗期活性最高,伸根期活性有所下降,到生理成熟期活性又上升至接近最高值,以后逐渐下降。该研究还同时发现:在工艺成熟期PPO活性已经下降到最高活性的30%,因此在该时期采收烟叶,从PPO活性考虑应该是比较合理的。2.比较出了不同浓度的NaDiCa,EDTA,巯基乙醇,硫脲4种抑制剂对烟叶中多酚氧化酶活性抑制效果的强弱顺序为NaDiCa,EDTA,巯基乙醇,硫脲。测定了在抑制剂存在的条件下pH值与温度对PPO活性的影响,结果表明,在抑制剂存在的条件下,PPO的最适pH值为7.0左右,最适温度为40℃.通过比较筛选出了对PPO活性有明显抑制效果的3个抑制剂浓度(3mmol/L,4mmol/L,5mmol/L)。这几种抑制剂对PPO的抑制作用都属于可逆抑制,增加抑制剂浓度导致酶活力的下降是由于酶活力受到抑制,催化效率降低,而不是通过导致有效的酶量减少,而引起酶活力的下降。3.对于NaDiCa,EDTA和硫脲通过叶面喷施法、抑制剂溶液浸泡叶片法和抑制剂溶液浸泡叶柄法3种不同的施用方式对烟叶中PPO活性的影响进行了分别试验,并进行了处理后烤烟的相关指标的测定。结果比较出了3种抑制剂的施用方法对PPO活性抑制效果的顺序为:叶面喷施法优于叶片浸泡法,优于叶柄浸泡法。叶片喷施法中用4mmol/L的抑制剂喷施10天3次的效果均最佳。4.试验比较了用4mmol/L的NaDiCa,EDTA和硫脲3种抑制剂通过叶面喷施10天3次处理后烤烟的各相关指标。结果显示,用NaDiCa处理后的烟叶能明显抑制烘烤过程中的褐变作用,对于应用于生产实践中控制烟叶褐变,提高烟叶品质和质量能起到较好的效果。