【摘 要】
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伴随着“一杯奶,强壮一个民族”的口号,牛奶已经成为各个年龄段人群日常饮食中不可或缺的重要组成,其安全性自然也会受到越来越多的关注。蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus,B.cereus）是污染生乳的主要病原微生物之一。它能在不利于微生物繁殖的极端条件下产生孢子,可通过多种途径污染到乳及乳制品。而且,B.cereus产生的热稳定性的蛋白酶可以分解牛奶中的蛋白质,降低牛奶的品质。为了确定生乳中
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伴随着“一杯奶,强壮一个民族”的口号,牛奶已经成为各个年龄段人群日常饮食中不可或缺的重要组成,其安全性自然也会受到越来越多的关注。蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus,B.cereus）是污染生乳的主要病原微生物之一。它能在不利于微生物繁殖的极端条件下产生孢子,可通过多种途径污染到乳及乳制品。而且,B.cereus产生的热稳定性的蛋白酶可以分解牛奶中的蛋白质,降低牛奶的品质。为了确定生乳中蜡样芽孢杆菌的来源和致腐潜力,本研究以天津某牧场采集的18份生乳样品和82份环境样品为研究对象,采用培养法、生化鉴定和聚合酶链式反应（PCR）分离鉴定出47株B.cereus。使用多位点序列分型（Multilocus Sequence Typing,MLST）分型方法得到14种序列类型（Sequence type,ST）,其中有5个ST是新的。使用BioNumerics软件对生乳中B.cereus来源的进行溯源,发现生乳中分离出来的主要的序列类型ST1150与粪便、空气、饮用水、乳头皮肤、奶杯、药浴杯有关,表明B.cereus在环境中普遍存在。利用PCR确定了B.cereus携带溶血性肠毒素基因A（hemolytic enterotoxin gene A,hblA）、hblC,hblD;非溶血性肠毒素基因A（Non-hemolytic enterotoxin gene,nheA）、nheB,nheC;蜡样内酯合成酶基因B（Cereloid synthase gene B,cesB）的情况,发现了13种毒力基因携带模式。探究了不同温度下B.cereus的蛋白酶的活性及在4种热处理组合下的耐热性,发现在55℃,5min和95℃,5min热处理组合下,42株（100%）B.cereus均保持活性;在121℃,10s热处理组合下,有9株（21.43%）B.cereus失活;在135℃,5-8s热处理组合下,有21株（50%）B.cereus失活,表明B.cereus具有很大的致腐潜力。
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